肺癌患者血浆及支气管肺泡灌洗液游离RNA测定与临床意义

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目的:最近研究证实游离RNA的存在,其具有肿瘤细胞来源,使之成为了肿瘤研究的热点。GAPDH mRNA是编码磷酸甘油醛脱氢酶的看家基因,在所有类型的细胞内呈组成性表达, GAPDH mRNA是体液中表达最为丰富的游离RNA之一,测定体液中该基因的拷贝数可以反映总游离RNA水平。为此,我们采用实时定量逆转录聚合酶链式反应(PCR)方法测定GAPDH mRNA拷贝数,探讨肺癌患者支气管肺泡灌洗液(BALF)和血浆游离RNA的表达及其临床意义。方法:以确诊的43例肺癌作为实验组,17例肺部良性病变作为对照组,采用实时定量PCR方法测定支气管肺泡灌洗液上清和血浆中游离GAPDH mRNA的拷贝数。常规细胞学方法检测肺泡灌洗液脱落细胞。应用受试者工作特征(ROC)曲线分析方法评价游离RNA诊断价值。采用CA-1500型全自动血凝分析仪测定两组血液的凝血指标。结果:(1)肺癌及良性疾病组BALF和血浆中均可检测到游离RNA的存在。(2)肺癌患者BALF中游离RNA拷贝数明显高于肺良性病变组(t=3.457,P=0.001),但血浆中游离RNA两组比较差别无统计学意义。(3)肺泡灌洗液细胞学检查肿瘤细胞阳性组游离RNA拷贝数明显高于阴性组(t=2.094,P=0.024)。(4)肺癌游离RNA拷贝数在不同的病理类型、临床分期中无差异(P>0.05)。(5) ROC曲线分析肺泡灌洗液游离RNA对肺癌的诊断价值: ROC曲线最佳工作点对应的游离RNA拷贝数对数、敏感性和特异性分别为4.433、86.0%、76.5%,ROC曲线下面积0.882。当特异性为100%时,诊断的敏感性为53.5%。(6)肺癌组血浆纤维蛋白原含量明显高于肺良性疾病组(t= 2.427,P= 0.018)。(7)肺癌血浆游离RNA拷贝数的对数与纤维蛋白含量呈正相关(r=0.668,P<0.05)。结论:应用荧光定量PCR方法检测BALF中游离RNA诊断肺癌具有较高的特异性、敏感性,对肺癌的诊断具有一定的价值。肺癌患者血液处于高凝状态,游离RNA可能参与了肺癌患者高凝状态形成。
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