鲤鱼鱼鳞胶原肽的制备及特性研究

来源 :吉林农业大学 | 被引量 : 9次 | 上传用户:lovehlq
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我国的淡水鱼资源十分丰富,在加工过程中会产生很多下脚料,在这些下脚料的有相当大的一部分的没有得到充分的利用,大多是以饲料的形式进行初加工,有的甚至直接废弃,这是资源的极度浪费。近年来由于哺乳动物的疾病全球流行导致人们对哺乳类动物的胶原来源的安全性产生质疑,所以水产类胶原是十分值得研究的。本文是以鲤鱼鱼鳞为原料进行胶原肽的制取,并对制取的肽进行性质的测定。主要的研究内容及结果如下:在制备鱼鳞胶原肽之前,对鱼鳞进行酸处理和碱处理是十分必要的,不但可以提高胶原肽的提取率,而且有利于提高胶原肽的纯度与品质。最佳的酸处理条件为:用盐酸浓度为0.4mol/L,浸酸时间为36h,料液比为1:20,脱钙率为95.52%;最佳的碱处理条件为:NaOH的浓度为0.2mol/L,浸泡时间为12h,料液比为1:15。经过以上处理后的鱼鳞主要成分为粗胶原,并且鱼鳞呈白色透明状态。本试验选取了四种蛋白酶对鲤鱼鱼鳞粗胶原进行水解,以水解度为标准来研究料液比、酶的添加量、反应时间以及酶解温度对胶原肽提取的影响,并通过正交试验的方法确定了最佳的水解工艺条件,其试验结果如下:中性蛋白酶的最佳水解条件为:底物浓度为8%,酶的添加量为6%,酶解时间为48h,温度为55℃,此时的水解度为45.53%;木瓜蛋白酶的最佳水解条件为:底物浓度为6%,酶的添加量为8%,酶解时间为48h,温度为55℃,此时的水解度为36.49%;胰蛋白酶的最佳水解条件为:底物浓度为6%,酶的添加量为5%,酶解时间为36h,温度为35℃,此时的水解度为28.31%;胃蛋白酶的最佳水解条件为:底物浓度为8%,酶的添加量为8%,酶解时间为48h,温度为35℃,此时的水解度为47.06%。从水解度的角度看胃蛋白酶>中性蛋白酶>木瓜蛋白酶>胰蛋白酶,为了进一步验证试验的准确性,得到了同样的结论。采用葡聚糖凝胶色谱对鲤鱼鱼鳞胶原肽进行分子量的测定及分离,由于胶原肽为混合物,所以只能根据出峰的时间大致推算其分子量的大小范围。按照色谱图上的五个主峰进行分离,其分子量主要为:9546Da、8814.6Da,7733.4Da,5793.6Da,3684.2Da。将按分子量分离出的胶原肽分别进行活性的测定,包括羟自由基的清除能力、抗氧化能力以及清除DPPH·的能力,根据测定的结果可以得到以下结论:胶原肽具有以上的活性;肽的分子量越小,其活性越强;混合的肽液没有分离出的肽液活性强。探索性试验:将鲤鱼鱼鳞在4℃条件下用胃蛋白酶进行水解,此条件下制备的胶原肽与试验中的提取物进行比较,结果表明两者之间无论是从分子量还是活性基本上没有区别。
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