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目的观察胰岛素促泌剂(格列吡嗪)对体外培养的小鼠成骨细胞MC3T3-E1株的增殖、凋亡及COL-1功能基因表达的影响。同时检测Bcl-2、Bax蛋白的表达,初步探讨格列吡嗪对成骨细胞凋亡影响的作用机制。方法1.实验方法:以小鼠前体成骨细胞MC3T3-E1为研究对象,将试验分为4组,分别给予10、20、50μmol/l浓度的格列吡嗪干预,对照组为含相同剂量的DMSO,干预48h后,用CCK-8法检测细胞增殖活性,AnnexinV-FITC/PI双染法流式细胞术定量检测细胞早期的凋亡率,Westen blotting方法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达,实时荧光定量PCR法检测细胞COL-1基因的表达。2.统计学方法:数据用均数±标准差(x±s)表示,采用SPSS17.0统计分析软件对实验数据进行分析,多组总体比较采用单因素方差分析(One-wayANOVE),两两组间比较采用LSD-t法,对Bcl-2/Bax与细胞凋亡率之间采用Spearman等级相关秩检验。检验标准P<0.05。结果(1)与对照组相比,格列吡嗪干预组成骨细胞增殖活性明显增强(P<0.05),细胞增殖活性随着药物浓度高而逐渐升高,组间两两比较均有统计学差异(P<0.05)。(2)与对照组相比,格列吡嗪干预组成骨细胞早期凋亡率明显降低(P<0.05),且随药物浓度增高而逐渐降低,组间两两比较具有统计学差异(P<0.05)。(3)与对照组相比,格列吡嗪干预组成骨细胞抗凋亡Bcl-2蛋白表达随着药物浓度增高逐渐增加(P<0.05),促凋亡Bax蛋白表达随着药物浓度增高呈递减趋势(P<0.05)。Bcl-2/Bax蛋白表达强度比与细胞凋亡率呈显著负相关(n=12,r=-0.923,P<0.05)(4)与对照组相比,格列吡嗪干预组成骨细胞COL-1功能基因表达明显上调(P<0.05);随着格列吡嗪浓度增高,COL-1基因表达呈上升趋势,组间两两比较均具有统计学差异(P<0.05)。结论1.格列吡嗪能在体外剂量依赖性促进小鼠前体成骨细胞MC3T3-E1的增殖及COL-1基因表达,抑制细胞早期凋亡,提示格列吡嗪对成骨细胞具有保护作用。2.格列吡嗪抑制细胞凋亡,与Bcl-2/Bax凋亡机制密切相关。