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实验室与其他人的研究均发现热休克蛋白gp96可通过抗原递呈激活病毒或肿瘤特异性T细胞,但小鼠实验和临床试验均显示其免疫功能受多种因素的制约,免疫活性有待进一步提高。之前的研究发现gp96介导的免疫反应取决于细胞毒性T细胞(CTL)和调节性T细胞(Treg)的平衡,因此,研究gp96疫苗与全身性Treg的去除在抗肿瘤过程中是否能够发挥协同作用。在gp96-多肽复合物免疫的BALB/c小鼠中,Treg的去除能够使脾脏和淋巴结中IFN-γ分泌的CD8+和CD4+T细胞分别提高1-2倍和40-50%。与对照组相比,实验组多肽特异性的CTL也有明显提高。在C57BL/6J小鼠中,Treg的去除增强肿瘤来源的gp96对B16黑色素瘤的抗肿瘤效果。与单纯免疫gp96组相比,敲除Treg能够明显增强gp96介导的肿瘤特异性的CTL反应,并且能够显著增加肿瘤浸润的CD8+T细胞,从而抑制了肿瘤的生长。研究结果表明,将Treg作为靶点能够增强gp96介导的细胞免疫应答和抗肿瘤活性。
从患者肿瘤组织中提取的热休克蛋白gp96天然结合多种肿瘤抗原,作为新型肿瘤疫苗在欧美等地已经用于黑色素瘤、肾癌、神经胶质瘤等多种肿瘤的临床免疫治疗,疗效显著,但目前面临的主要问题是受肿瘤组织来源的限制gp96疫苗提取量非常有限,严重制约了免疫治疗效果。汉逊酵母表达的gp96蛋白与B16.F10黑色素瘤抗原体外组装成rgp96-肿瘤抗原复合物,应用该复合物免疫C57BL/6小鼠。研究发现与单纯rgp96或肿瘤抗原免疫组相比,体外合成的rgp96-肿瘤抗原复合物免疫能够显著抑制B16肿瘤的生长,同时酶联免疫斑点实验,细胞因子染色,杀伤实验结果显示,rgp96-肿瘤抗原复合物免疫可明显提高肿瘤特异性T细胞活性。rgp96-肿瘤抗原复合物的抗肿瘤免疫活性与从肿瘤组织中提取的gp96接近。该研究为大量制备新型gp96肿瘤疫苗提供了依据。