红景天的快繁及其资源保存的研究

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为解决红景天资源短缺问题,本论文系统研究了激素对四裂红景天愈伤组织的诱导和培养的影响、不同红景天品种的毛状根诱导、暗培养对珍稀名贵长鞭红景天的快繁再生体系的影响以及选取不同的参数优化超低温保存的工艺。通过研究得出以下结论:1)诱导四裂红景天愈伤组织的最佳外植体是种子,诱导愈伤组织的培养基最佳配比方案为MS + 6 - BA 3.0 mg/L + NAA 2.0 mg/L + 2,4 - D 1.0 mg/L,诱导率为87.1 %。2)愈伤组织继代培养的最佳配方为6 - BA 3.0 mg/L + NAA 1.0 mg/L + 2,4 - D 1.0 mg/L。红景天细胞的生长曲线呈“s”型,培养周期为30 d,在第21 d生物量达到最大值为13.72 g/L。3)红景天毛状根诱导过程中,除了玫瑰红景天愈伤组织细胞诱导出毛状体外(但在后期的培养过程中也相继死亡),其余材料全部因褐化、污染而死亡。4)取长鞭红景天无菌幼苗的叶片、叶柄和茎为外植体,设计不同暗培养时间,实验结果表明暗培养的最佳材料是叶片,最佳暗培养时间为15天,其出芽总数为1520,是不暗培养的2.46倍。5)考察了长鞭红景天在不同暗培养诱导再生的过程中内源激素的变化,结果表明适当的暗培养提高了内源激素的水平,暗培养15天与不暗培养相比,内源激素ZT,GA3,IAA和ABA的含量分别提高了15.6%,4.9%,25.2%和8.2%。6)研究了长鞭红景天在不同暗培养诱导再生的过程中花青素和叶绿素的变化,结果发现适当的暗培养有利于降低花青素的积累,提高叶绿素的含量。暗培养15天与不暗培养相比,花青素的含量降低了3.71倍;叶绿素含量提高了4倍。7)以长鞭红景天无菌幼苗的芽尖和愈伤组织为超低温保存材料,超低温保存后材料的存活率和复活率为56 %和39 %,而芽尖组织的存活率和恢复率非常低,只有29 %和21 %。8)通过玻璃化保存方法建立了长鞭红景天种质超低温保存工艺,研究结果显示最佳外植体是愈伤组织,蔗糖预培养的最适浓度为0.3M,最佳装载时间为40 min,最适脱水时间是60分钟,最佳解冻温度为50℃,超低温保存后材料的存活率和复活率分别达到62 %和58 %。
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