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【目的】1、调查广州地区急性呼吸道感染住院儿童的人B组腺病毒感染流行情况;2、人B组腺病毒HAdV-B3、HAdV-B7在不同种属细胞中的基因表达模式。【方法】1、我们收集2017年05月-2019年04月广州医科大学附属第一医院儿科急性呼吸道感染(Acute respiratory infections,ARI)住院患儿的鼻咽拭子标本,使用ABC法核酸提取试剂盒提取核酸,并将提取的核酸进行荧光实时定量聚合酶链反应(荧光Q-PCR)检测腺病毒并分型,分析各型别腺病毒感染情况,及腺病毒感染的患儿年龄、季节分布情况等。2、采取SYBR?Green法对HAdV-B3、HAdV-E4和HAdV-B7感染人胚肾细胞Ad293细胞和猪肾细胞PK15细胞后主要早期基因(E1、E2、E3、E4)和主要晚期基因六邻体hexon的mRNA的表达进行定量分析,比较HAdV-B3、HAdV-B7与HAdV-E4各基因在受纳细胞(Permissive cell)和半受纳细胞(Semi-permissive cell)中的表达模式差异。【结果】1、1)本研究中3191位ARI住院患儿鼻咽拭子标本中呼吸道病毒总的阳性检出率为35.4%(1131/3191),其中男:女=2.17:1(774/357),患儿的年龄中位数是1.00岁(IQR,0.58-2.17);5岁以下的患儿占93.3%(1055/1131),3岁以下的患儿占83.6%(945/1131),1岁以下的患儿占54.2%(613/1131)。HAdV阳性检出率为5.0%(159/3191),其中男:女=2.31:1(111/48),患儿的年龄中位数是2.00岁(IQR,1-4),5岁以下的患儿占91.2%(145/159),3岁以下的患儿占69.8%(111/159),1岁以下的患儿占35.8%(49/159)。2)在HAdV各型别中,54.7%(87/159)为HAdV-B7感染,37.7%(60/159)为HAdV-B3感染。不同年龄段的患儿的HAdV-B3检出率差异有统计学意义(χ2=10.475,P=0.022<0.05),不同季节HAdV-B3检出率差异有统计学意义(χ~2=9.588,P=0.022<0.05)。不管是腺病毒整体还是各型别主要以单独感染为主,与其他病毒或不同型别腺病毒的混合感染较少。3)患儿总体病毒检出率和腺病毒检出率在5岁以内都超过了90%,呼吸道病毒总的阳性检出率随着年龄的增加,呈降低的趋势(χ2=151.3,P<0.001)。不同年龄段的患儿的HAdV检出率差异有统计学意义(χ2=38.498,P<0.001),不同年龄段的患儿的HAdV-B3检出率差异有统计学意义(χ2=25.745,P<0.001),不同年龄段的患儿的HAdV-B7检出率差异有统计学意义(χ2=24.208,P<0.001)。4)在2018年5月-2019年4月,总体病毒、HAdV和HAdV-B7、HAdV-B55的阳性检出率存在明显的差异,具有统计学意义的。2018年5月-2019年4月总体病毒、HAdV-B7、HAdV-B55阳性率明显高于前一年。2、在第二部分的研究中,HAdV-E4的早期基因E1、E2、E3、E4和晚期基因Hexon在PK15和Ad293细胞的基因表达量的变化是一致的。HAdV-B3的早期基因E1、E2、E3、E4在PK15和Ad293细胞的基因表达量的变化是一致的,而Hexon基因在PK15细胞中表达量受抑制,在20-24hour出现平台期,而在Ad293细胞中,Hexon基因呈现为持续上升。HAdV-B7的E1、E2、E3、E4基因在PK15和Ad293细胞的基因表达量的变化基本是一致,而其Hexon基因在PK15细胞中在感染后48hour出现明显下降。【结论】1、广州地区ARI住院患儿HAdV检出以单一病毒感染为主,但当与其他病毒混合感染时,以RSV最多见。0.5～3岁儿童是感染重点人群;同时HAdV各个季节都可出现,但HAdV-B3春季高发。临床医生应重视HAdV的检测及防治,警惕重症的发生。2、通过分析HAdV-B3、HAdV-B7早期基因E1、E2、E3、E4和晚期基因Hexon的表达的研究,我们发现人B组腺病毒的晚期基因在PK15细胞中的表达模式与在Ad 293细胞中有显著差异,为宿主限制因子的进一步鉴定提供了线索,也为构建动物模型奠定了理论基础。