手术是目前治疗食管癌的主要手段,然而却有着较高的并发症发生率,吻合口狭窄是食管癌术后的常见并发症,严重威胁患者术后的生活质量,而管状胃吻合口周围组织缺血是这个并发症的一大危险因素,作为食管替代物,管状胃的血流灌注状态极大影响着术后结局。而目前缺乏研究食管-胃吻合口术后狭窄的相关动物模型,其预防及治疗手段也较为有限。热成像仪是一种基于红外线的温度传感器,被广泛应用于动物及人体实验,已被证明可以用来评估组织的血流灌注情况。PEO-PPO-PEO共聚物是一种基于聚环氧乙烷和聚环氧丙烷三嵌段的两亲性嵌段共聚物,其20%的水溶液可以因温度的变化呈现出液态-凝胶态的转变,在药物研究领域被广泛用于药物载体,同时也可以与病毒载体相结合成为基因治疗中的基因递送系统。MiR-126是一种内皮细胞特异性microRNA,其在促进血管生成、维持内皮细胞功能上发挥重要作用。因此,本文进行了三个方面的研究:1、建立大鼠食管-胃吻合口狭窄的动物模型目的:探索预防食管-胃吻合口狭窄的治疗方法,研究吻合口狭窄的病理改变。方法:以大鼠为实验动物,在红外线热成像仪的辅助下,定位胃在离断血管后的相对缺血区域用于制作吻合口,并设立血流灌注良好的对照组。以胃镜及钡餐消化道造影来评估吻合口情况。以HE和Masson染色来研究吻合口的病理改变。结果:缺血组相较对照组出现的显著的吻合口狭窄,狭窄吻合口相较灌注良好吻合口有更多的结缔组织增生及胶原沉积。结论:在热成像仪的辅助下我们建立了相对稳定的大鼠食管-胃吻合口狭窄模型,并可以用来进一步探索预防吻合口狭窄的治疗方法。2、PEO-PPO-PEO水凝胶搭载microRNA-126腺病毒对缺血胃壁的转染效果目的:检测PEO-PPO-PEO水凝胶支架+腺病毒载体这一基因递送系统在缺血胃壁组织中的基因递送效率。方法:设立空白对照组、PBS+腺病毒组、水凝胶+病毒组,分别在第1周和第2周检测病毒的转染效果及目的基因的表达效果。结果:与裸病毒组相比,水凝胶支架组虽然在第1周的转染及表达效率较低,但在第2周呈现出了更为理想的转染及表达效果。结论:在PEO-PPO-PEO水凝胶支架的保护下,miR-126重组腺病毒可以缓慢持续地被释放入靶组织,并可以在相当长的一段时间发挥作用。3、PEO-PPO-PEO水凝胶搭载microRNA-126腺病毒对大鼠食管-胃吻合口狭窄的预防效果目的:研究以PEO-PPO-PEO水凝胶支架+腺病毒载体为基因递送系统,基于miR-126的基因治疗是否能预防食管-胃吻合口狭窄的发生。方法:以大鼠食管-胃吻合口狭窄的动物模型为平台,将PEO-PPO-PEO水凝胶搭载microRNA-126腺病毒的混合物在术中注射至刚完成的吻合口周围的胃组织中。并通过胃镜、钡餐消化道造影随访吻合口情况,通过免疫荧光染色评估吻合口周围微血管生成情况。结果:相较其他两组,水凝胶+腺病毒组有更小的术后狭窄率,吻合口周围有更小的结缔组织增生及胶原沉积,吻合口周围胃组织中有更高的微血管密度。结论:PEO-PPO-PEO水凝胶搭载microRNA-126腺病毒在预防食管-胃吻合口术后狭窄方面具有治疗效果。综上所述,以PEO-PPO-PEO水凝胶支架+腺病毒载体为基因递送系统,基于miR-126的再生医学基因治疗在预防缺血引起的大鼠食管-胃吻合口术后狭窄方面具有很大的治疗潜力。但其安全性仍有待进一步研究,基因递送系统仍有待进一步优化。