Alport综合征 (Alport syndrome，AS) 是一种以进行性。肾功能减退和肾小球基底膜结构异常伴神经性耳聋，眼病为临床特征的遗传性肾病。基因诊断是目前最为可靠的诊断AS患者的方法，也是确定遗传型的方法和证据、确定携带者的诊断手段。目前，国内外学者已报道380多种COL4A5基因突变，突变类型多种多样，未发现有“热点突变”，检测COL4A5基因突变的方法也各不相同，但检测的灵敏度都较低。研究方便、高效、快捷的基因诊断方法，已成为现今国内外研究的热点。本研究通过对一AS家系进行临床分析并应用多重PCR－单链构象多态性(single strand conformation polymorphism，SSCP)的方法检测COL4A5基因突变，分析我国AS患者临床特点，试图建立一种简捷、高效的AS基因诊断方法。 目的: 调查Alport综合征的遗传方式及临床特点，研究我国X连锁显性遗传AS编码Ⅳ型胶原α<,5>链的COL45基因突变及临床特点，建立一种简捷、高效的AS基因诊断方法。 方法: 对本家系(30人)进行家系调查及现存24例成员进行体格检查、实验室检查、病理及超微结构检查。提取本家系15例现存家系成员及2例无肾脏病表现及家族史的正常对照基因组DNA。根据COL4A5基因中与外显子相邻的内含子序列，设计52对引物扩增COL4A5基因53个外显子及启动子区域，将52对引物分成9组多重PCR组合，其中7组包含6对不同的引物，2组包含5对不同引物，扩增COL4A5基因全部外显子区域。以非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定产物，再作SSCP分析，如有迁移率异常组，对该组所有外显子再单独进行扩增及SSCP分析，如仍检测到迁移率异常的单链条带，则对该PCR产物直接测序。测序结果与Genbank中的COL4A5基因正常序列比对，寻找突变位点。 结果: 本家系中15例符合AS诊断标准，男性6例，女性9例，其中5例因终末期肾衰竭已死亡。现存10例AS患者均有血尿，其中伴有蛋白尿者有7例；神经性耳聋6例；眼病7例。12例有球蛋白升高，6例有脂蛋白升高，5例有总胆固醇升高，5例有甘油三脂升高。以全血基因组DNA为模板，成功扩增COL4A5基因所有外显子，将52个外显子分成9组进行多重PCR，有7组可成功扩增出全部外显子，而第7组的exon24及第9组的exon5+6未扩增出，经单独扩增可获得满意的PCR产物。将多重PCR产物及单个PCR产物进行SSCP分析，经AgNO<,3>染色后均可见清晰的单链条带，发现本家系成员Ⅱ<,4>、Ⅲ<,4>、Ⅲ<,12>第1组存在迁移率异常的条带，以Ⅱ<,4>、Ⅲ<,4>、Ⅲ<,12的DNA为模板重新单独扩增第1组所有外显子后再进行SSCP分析，未发现有迁移率异常的单链条带。单独扩增所有标本的exon24及exon5+6后进行SSCP分析，未发现有单链DNA迁移率异常者。 结论: 1．本家系遗传方式为X连锁显性遗传，血尿和蛋白尿发生率较高；高球蛋白血症、高血脂发生率较高，其意义尚待探讨。 2．基本排除本家系COL4A5基因外显子存在突变。 3．6个外显子可以在同一反应体系中同时扩增，并可通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳对其进行SSCP分析。