【摘 要】
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目的研究骨髓基质细胞的分化状态对腺病毒介导的人BMP2基因表达效应的影响.方法比较不同剂量AdBMP-2转染骨髓基质细胞的碱性磷酸酶(ALP)比活性并筛选出病毒最佳作用剂量.在含
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目的研究骨髓基质细胞的分化状态对腺病毒介导的人BMP2基因表达效应的影响.方法比较不同剂量AdBMP-2转染骨髓基质细胞的碱性磷酸酶(ALP)比活性并筛选出病毒最佳作用剂量.在含地塞米松l0<-8>mol/L、L=抗坏血酸50ug/ml、β=甘油磷酸钠10mmol/L的DMEM液中培养骨髓基质细胞3天后再加入AdBMP-2作用6天,以未诱导培养单纯加入AdBMP-2为对照组,收集细胞检测ALP比活性,以及进行BMP-2和骨桥蛋白(OPN)免疫组化染色与蛋白印迹检测,观察BMP-2表达量和OPN的变化.结果转染AdBMP-2后细胞ALP比活性明显增加,转染前分化状态对ALP无显著影响,但AdBMP-2最适转染指数为MOI=50,随着剂量增加细胞ALP比活性反而降低;转染AdBMP-2前已向成骨细胞方向分化的骨髓基质细胞BMP-2和OPN表达量显著高于未诱导培养组.结论己向成骨细胞方向分化的骨髓基质细胞转染AdBMP-2后BMP-2和OPN表达量显著增加,提高了目的基因表达的效应.
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