中药木豆叶总黄酮对股骨头坏死治疗作用的实验研究

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背景和目的股骨头坏死是骨科常见病,多发病,是一种对髋关节具有特殊破坏性的退行性病变,病程长且致残率高,严重危害人民的健康,是骨科领域较为棘手的难题之一。其病因及发病机理尚未完全明了,治疗方法多种多样,但对各种治疗方法的选择及其疗效存在很大争议,对于成人早期股骨头坏死行人工关节置换尚为期过早,因此如何有效地治疗成人股骨头坏死,防止疾病的进一步发展,保护股骨头,延缓髋关节置换的手术时间是值得关注的问题。近十年来,随着祖国医学对成人股骨头坏死研究的不断深入,中医药治疗成人股骨头坏死得到一定的发展。木豆叶是传统方药通络生骨胶囊的主要成分,自1982年以来单独或配合手术应用,已经治愈大批股骨头坏死患者,前期的大量实验研究表明该药具有确切的疗效。本实验的目的就是采用动物实验模型观察木豆叶治疗股骨头坏死的机理,为进一步扩大临床应用提供坚实的理论依据。方法本课题的实验部分健康SD幼年期大鼠60只,雌雄各半,随机分为六组,A组(模型组n=10);B组(空白对照组n=10);C组(丹参对照组n=10);D组(木豆叶低剂量组n=10);E组(木豆叶中剂量组n=10);F组(木豆叶高剂量组n=10);适应性饲养三天后开始造模,建立液氮冷冻股骨头坏死模型。造模后第一天开始给予药物治疗,D、E、F组分别按20mg/Kg、40mg/Kg、80mg/Kg给药,C组按40mg/Kg剂量给药,A、B组注射等量生理盐水。各组大鼠均每日注射一次,连续注射四周。每周一次,通过X线直观的观察股骨头坏死修复情况;治疗四周后麻醉处死动物,进行如下检测:采血,分离血清,测量血清钙,磷含量,ALP活性;取完整股骨头脱钙:处理后行组织形态学观察,采用苏木素-伊红(HE)染色,观察股骨头内各部位的坏死和用药后骨修复情况;通过免疫组化染色观察股骨头坏死区单位面积血管计数及血管横截面积来检测再血管化情况。结果治疗组与模型组对比在组织形态学上都得到了明显修复、获得了改善,而钙磷常数以及ALP在木豆叶各治疗组(D、E、F)与模型组(A)对比都获得了明显的统计学意义(P<0.01)。HE染色观察模型组骨小梁稀疏,变细,有断裂现象,结构紊乱,有碎片出现。骨小梁中骨细胞固缩、边聚或消失,空骨陷窝明显增多,髓腔内脂肪细胞体积增大,有的融合成泡状,骨小梁周沿可见梭形成骨细胞排列,但数量很少。木豆叶各组(D、E、F)均见骨小梁排列整齐,规则,致密饱满,无碎裂。骨小梁上骨细胞核清晰可见,位于中央,少见空骨陷窝存在。髓腔内造血细胞丰富,无明显大的脂肪滴。骨小梁周沿梭形成骨细胞数量增多,排列致密。免疫组化染色可见软骨细胞及血管内皮细胞着色,图像分析结果显示木豆叶各组(D、E、F)和丹参组(C)的阳性表达强度较模型组(A)增强,与模型组比较均有高度显著性差异(P<0.01)。结论木豆叶能增加新生骨钙的沉积、提高磷含量和碱性磷酸酶活性,强化对股骨头坏死区的修复作用。并能增强血管内皮细胞的阳性表达,增加股骨头坏死区血管数量,促进再血管化过程,改善股骨头的血液供应。
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