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动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）斑块内血管新生易引起斑块内出血、斑块破裂,诱发急性心脑血管事件,抑制血管新生的治疗措施可能为稳定AS斑块提供思路。现代研究发现中医血瘀证与AS斑块内血管新生密不可分,因此活血化瘀可能是治疗AS斑块内血管新生的新思路。川芎-赤芍药对（Chuanxiong-Chishao herb-pair,CX-CS）是活血化瘀经典药对,临床和基础研究均证实其对AS具有良好的效果,但CX-CS调节AS斑块内血管新生的机制尚不清楚。微小RNA126（microRNA-126,miR-126）是血管内皮细胞特异性表达的miRNAs,与AS的发生、发展密切相关,CX-CS是否通过调控miR-126发挥抑制血管新生、抗AS的作用尚不清楚。1.目的探讨CX-CS及其活性成分川芎嗪（tetramethylpyrazine,TMP）和芍药苷（paeoniflorin,PF）对AS斑块内血管新生的作用,并基于miR-126探讨CX-CS 及其活性成分 TMP-PF 干预 AS 斑块内血管新生的分子机制。2.方法（1）CX-CS对ApoE-/-小鼠AS斑块内血管新生的作用及机制以C57BL/6J小鼠为正常对照（control）,ApoE-/-小鼠随机分为模型组（model）、CX-CS 组、CX-CS+miR-126 拮抗剂（CX-CS+miR-126 antagonist）组、辛伐他汀组（simvastatin）。ApoE-/-小鼠高脂饲料喂养3个月,给予CX-CS浸膏或辛伐他汀1个月,给药前CX-CS+miR-126 antagonist组小鼠尾静脉注射腺相关病毒（AAV）介导的miR126a-5p antagonist。给药1个月后检测血清血脂（甘油三酯（triglyceride,TG）、总胆固醇（total cholesterol,TC）、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterol,LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein cholesterol,HDL-C））水平,酶联免疫吸附法（enzyme linked immuno sorbent assay,ELISA）检测血清血管内皮细胞生长因（vascular endothelial growth factor,VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）的表达,HE染色观察斑块面积,油红O染色观察斑块内脂质面积,免疫荧光检测斑块CD31的表达,PCR检测小鼠主动脉miR-126表达,western blot检测小鼠主动脉 VEGF、VEGF 受体 2（VEGF receptor2,VEGFR2）、bFGF 和 FGF 受体 1（FGF receptor1,FGFR1）的表达。（2）基于miR-126探讨CX-CS活性成分（TMP-PF）对氧化低密度脂蛋白（oxidized low density lipoprotein,ox-LDL）诱导的人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）血管新生的作用及机制Ox-LDL诱导HUVECs建立体外血管新生模型,以CX-CS活性成分川芎嗪（tetramethylpyrazine,TMP）、芍药苷（paeoniflorin,PF）配伍（1 μ mol/L TMP+10 μmol/L PF）干预 ox-LDL 诱导的 HUVECs。HUVECs 分为对照组（control）、模型组（model）、CX-CS 活性成分组（TMP-PF）、CX-CS 活性成分+miR-126抑制剂组（TMP-PF+miR-126 inhibitor）和辛伐他汀组（simvastatin）,以 miR-126 inhibitor转染 HUVECs 24 小时,ox-LDL 诱导 12小时,1 μ mol/L TMP+10 μmol/L PF干预24小时,观察内皮细胞增殖（MTT法）、迁移（划痕实验）、成管（细胞成管实验）情况,ELISA检测细胞上清液VEGF的表达,PCR检测内皮细胞miR-126的表达,western blot检测内皮细胞 VEGF、VEGFR2、bFGF、FGFR1 的表达。3.结果:（1）CX-CS通过上调miR-126抑制ApoE-/-小鼠斑块内血管新生与正常组相比,模型组小鼠TC、TG和LDL-C水平显著升高,HDL-C水平显著降低,斑块面积明显增大,斑块脂质浸润增加,斑块内新生血管密度增加（CD31表达升高）,主动脉VEGF、bFGF、VEGFR2和FGFR1表达明显上调,miR-126表达明显降低（P＜0.05）。与模型组比较,CX-CS组TG和LDL-C水平显著降低,斑块面积和斑块脂质浸润减少,斑块内新生血管密度减少（CD31表达降低）,主动脉VEGF、VEGFR2、bFGF和FGFR1表达水平降低,miR-126表达升高（P＜0.05）;加入miR-126拮抗剂后,CX-CS对血脂水平、斑块面积、斑块内血管新生以及miR-126、VEGF、VEGFR2表达的影响不显著（P＞0.05）;辛伐他汀组TG水平显著下降,主动脉斑块面积和斑块脂质浸润减少,斑块内新生血管密度减少（CD31表达降低）,主动脉bFGF和FGFR1表达水平降低（P＜0.05）。因此,CX-CS可能通过上调主动脉miR-126表达、下调VEGF和VEGFR2表达,降低小鼠血清LDL-C的水平,减轻斑块脂质浸润,抑制斑块内血管新生,从而缩小AS斑块面积、延缓AS的病理进程。（2）CX-CS活性成分（TMP-PF）通过升高miR-126抑制ox-LDL诱导的体外血管新生与对照组相比,ox-LDL可显著诱导模型组HUVECs增殖、迁移和成管,细胞培养上清液VEGF表达显著增加,细胞内VEGF、VEGFR2、bFGF、FGFR1表达明显增加,miR-126表达显著降低（P＜0.05）。与模型组相比,CX-CS活性成分（TMP-PF）显著抑制HUVECs的增殖、迁移和成管,降低细胞上清液VEGF表达水平,抑制细胞内VEGF、VEGFR2、bFGF、FGFR1表达,显著上调 miR-126 表达（P＜0.05）;加入 miR-126 inhibitor 后 CX-CS 活性成分（TMP-PF）对细胞增殖、迁移、成管、细胞上清液中VEGF表达及细胞内VEGF、VEGFR2表达无明显影响（P＞0.05）;辛伐他汀可以明显抑制细胞的增殖、迁移和成管,抑制VEGFR2、bFGF蛋白表达,上调miR-126表达（P＜0.05）。因此CX-CS活性成分（TMP-PF）可能通过上调miR-126表达、抑制VEGF/VEGFR2通路从而发挥抑制体外血管新生的作用。4.结论:CX-CS及其活性成分TMP-PF可能通过上调miR-126表达、抑制VEGF/VEGFR2通路而抑制斑块内血管新生,从而减小AS斑块面积、稳定斑块、延缓AS的病理进程。