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类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种常见的风湿性疾病,患病率约为0.4%-1.0%,该病如不能及时诊断和治疗,常在起病后1-3年出现关节畸形,严重影响日常工作和生活,提高其早期诊断率是医务工作者所关注的问题。类风湿因子(rheumatoid factor,RF)是诊断类风湿性关节炎的重要标准之一,快速高效准确地检测RF对RA的诊断及预后具有非常重要的意义。目前RF的检测方法有:胶乳凝集法、ELISA(enzyme linked immunosorbent assay)法和免疫比浊法(透射比浊法,散射比浊法,胶乳增强比浊法)。胶乳凝集法是较早的测定RF的方法,但仅能对RF进行半定量测定,且只能测定IgM-RF。后两种方法可对RF进行定量测定,ELISA法可测定RF及其亚型。目前,随着全自动生化分析仪的普及,散射比浊法和透射比浊法是近年来使用较多的RF测定方法,在这两种检测方法的基础上又建立了灵敏度更高乳胶增强比浊法,但目前的检测试剂为国外进口,费用昂贵,开发低价质优的国产RF检测试剂盒对于减轻患者负担具有重要的意义。本课题的旨在根据胶乳比浊法的基本原理,开发具有自我知识产权国产RF定量检测试剂盒,为临床诊断提供价格低廉、临床诊断价值高的试剂。将大小均一粒径为100nm的聚苯乙烯胶乳颗粒进行透析处理,制备工作微球。应用硫酸铵沉淀及亲和层析的方法,从健康人血清中提取纯化人免疫球蛋白IgG,并将提取的IgG交联到工作微球上,得到免疫微球。以不同浓度的PEG6000为加速剂,观察免疫微球与RF的凝聚情况。选择PEG6000的最适浓度、RF最佳反应时间、反应温度、加样量、检测波长,并绘制RF标准曲线,确定RF检测的线性范围。通过重复性实验测定批间批内变异系数,回收实验确定系统误差,确定正常人群RF参考值范围。测定通过金标准确认RA患者血清RF,计算敏感性、特异性。实验结果表明胶乳比浊法RF定量检测的最佳反应条件为:PEG的最佳浓度为3.8%,胶乳的最佳浓度为0.30%,加样量为10μL,检测波长500nm,反应时间共15分钟。批内、批间变异系数分别为1.80～4.33%和7.5 3～14.14%;RF检测试剂的评价结果为:检测敏感度为81.5%,特异性为69.0%,跃顿指数50.5%;样品中加入已知量RF测定,回收率为94.2～1 06.5%,对含高浓度RF的血清样品稀释测定,结果表明方法的健全性良好。最低测定灵敏度为3IU/ml。稳定实验试剂保质期为12月以上(4℃)。成功地制备了胶乳比浊法RF定量检测试剂盒,为临床实验室RF的检测提供了新的选择。