【摘 要】
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目的:探究趋化素样因子超家族成员6(CKLF-like MARVEL transmembrane domain-containing 6,CMTM6)在胶质瘤中的表达及临床意义,并评估其对胶质瘤细胞生物学功能的影响。方法:
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目的:探究趋化素样因子超家族成员6(CKLF-like MARVEL transmembrane domain-containing 6,CMTM6)在胶质瘤中的表达及临床意义,并评估其对胶质瘤细胞生物学功能的影响。方法:采用免疫组化、免疫荧光、Western blot及qRT-PCR技术检测CMTM6在46例临床胶质瘤组织、171例胶质瘤组织芯片及胶质母细胞瘤细胞系中的表达;应用RNAi技术敲低胶质母细胞瘤细胞系中CMTM6的表达以评估在胶质瘤细胞中CMTM6对PD-L1表达的影响;应用CCK-8、Wound Healing和Transwell实验分别测定CMTM6敲低后对胶质瘤细胞增殖水平、迁移程度和侵袭强度的影响。结果:CMTM6表达于神经胶质细胞的胞质和胞膜。CMTM6在胶质瘤组织中的表达(61.69±21.07)高于正常脑组织(15.84±6.93),差异有统计学意义(P<0.01);高级别组CMTM6阳性表达高于低级别组,差异有统计学意义(P<0.05)。胶质瘤组织芯片生存分析结果显示,CMTM6高表达患者的总生存期和无病生存期均比低表达患者明显缩短(OS:P=0.002;DFS:P=0.007);CMTM6高表达患者的五年累积总生存率和无病生存率(OS:64%;DFS:47%)较低表达患者(OS:86%;DFS:68%)有明显下降趋势;患者的年龄(OS:HR=3.946,P<0.001;DFS:HR=2.605,P<0.001)、临床病理分级(OS:HR=13.937,P<0.001;DFS:HR=6.118,P<0.001)及 CMTM6 的表达状态(OS:HR=2.504,P=0.017;DFS:HR=1.603,P=0.047)都可作为评判胶质瘤预后的独立危险因素。CMTM6在胶质母细胞瘤细胞系(U87、U251)中的表达高于人脑正常胶质细胞系(HEB),差异有统计学意义(P<0.01)。在U87和U251细胞中,慢病毒介导的CMTM6敲低后能显著降低PD-L1蛋白的表达,但是对PD-L1 mRNA的表达无显著影响。此外,增殖实验显示,CMTM6敲低后胶质母细胞瘤细胞系增殖能力显著降低(P<0.05)。划痕实验显示,U87和U251细胞系划痕24h后,CMTM6敲低组的迁移程度显著降低(P<0.01)。侵袭实验显示,U87和U251细胞系中,CMTM6敲低组穿膜细胞的数量显著降低(P<0.01)。结论:CMTM6在胶质瘤组织和胶质母细胞瘤细胞系U87、U251中高表达;CMTM6表达水平与胶质瘤临床病理分级有关;CMTM6的高表达与胶质瘤患者的预后及生存期有关,可作为胶质瘤预后评判的独立危险因素。CMTM6在胶质瘤中的异常表达参与调控胶质瘤细胞中PD-L1蛋白表达以及参与调控细胞增殖、迁移、侵袭等细胞功能,与胶质瘤的发生发展有关。
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