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探讨高糖（high glucose）对人视网膜色素上皮细胞（cultured human retinal pigmentepithelial cells-19，ARPE-19）细胞生长、活性氧（reactive oxygen species，ROS）、线粒体DNA损伤标记物8-羟基鸟嘌呤（8-oxo-7，8-dihydroguanine，8-oxoG）及DNA损伤修复标记物8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶（human8-oxoguanine DNA glycosylasel，hOGG1）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、色素上皮细胞衍生因子（pigment epithelium-derivedfactor，PEDF）表达的影响以及可能的信号传导通路。
[方法]
体外培养人视网膜色素上皮细胞ARPE-19，随机分成四组，即正常对照组用含5.6mmol.L-1葡萄糖的DMEM/F12培养液，高糖组用30 mmol.L-1葡萄糖的DMEM/F12培养液，高糖+SB203580组用p38-MAPK（p38 mitogen activated protein kinase，p38-MAPK）特异性阻断剂SB20358010μmol.L-1预处理30min后，再用含30 mmol.L-1葡萄糖的DMEM/F12培养液，甘露醇组（渗透压对照组）用含5.6 mmol.L-1葡萄糖和24.4 mmol.L-1甘露醇的DMEM/F12培养液。各组培养24h、48h、72h，以MTT法检测各组视网膜色素上皮细胞的增生活力；以2，7-二氯荧光素二乙酸酯（2’，7’-dichlorofluorescin-diacetate，DCFH-DA）法检测细胞内ROS的产生情况；以免疫细胞化学（immunocytochemistry，ICC）方法检测细胞内8-oxoG的表达情况，以蛋白免疫印迹法（Western Blot）检测胞浆中hOGG1、TNF-α、PEDF的表达情况。
[结果]
MTT法显示：当以不同浓度葡萄糖培养液干预ARPE-19细胞后：①与正常对照组相比，高糖组、高糖+SB203580组在24h、48h、72h，均能抑制ARPE-19细胞的增殖（P<0.01）。②与正常对照组相比，甘露醇组（渗透压对照组）在24h、48h、72h，均不影响ARPE-19细胞的增殖（P>0.05）；③与高糖组相比，高糖+SB203580组在48h、72h，对ARPE-19细胞增殖的抑制作用减弱（P<0.05）。
DCFH-DA法检测细胞内ROS显示：①与正常对照组相比，高糖组、高糖+SB203580组干预ARPE-1924h、48h、72h，细胞内ROS表达量明显增加（P<0.01），以72h干预时ROS表达水平最高，各组ROS表达量均有随时间延长而增加的趋势。②在24h、48h，高糖组、高糖+SB203580组ROS表达量无统计学差异（P>0.05）；在72h，高糖+SB203580组较之高糖组ROS表达量减少（P<0.01）。⑨与正常对照组相比，甘露醇组（渗透压对照组）在24h、48h、72h，均不影响ARPE-19细胞ROS的表达（P>0.05）。
免疫细胞化学检测显示：①与正常对照组相比，高糖组、高糖+SB203580组干预ARPE-1924h、48h、72h，细胞内8-oxoG表达量明显增加（P<0.01），各组8-oxoG表达量均有随时间增加的趋势。②在24h、48h、72h，高糖+SB203580组较之高糖组8-oxoG表达量减少（P<0.01）。③与正常对照组相比，甘露醇组（渗透压对照组）在24h、48h、72h，均不影响ARPE-19细胞8-oxoG的表达（P>0.05）。
蛋白免疫印迹法检测显示：（1）hOGG1：①与正常对照组相比，高糖组、高糖+SB203580组干预ARPE-1948h、72h，细胞内hOGG1表达量明显减少（P<0.01）。②在24h、48h，高糖组、高糖+SB203580组细胞内hOGG1表达量差别无统计学差异（P>0.05）；在72h，高糖+SB203580组较之高糖组hOGG1表达量增加（P<0.05）。③高糖组、高糖+SB203580组在24h、48h、72h细胞内hOGG1表达量有先下降后增高的趋势。④与正常对照组相比，甘露醇组（渗透压对照组）在24h、48h、72h，均不影响ARPE-19细胞hOGG1的表达（P>0.05）。
（2）TNF-α：①与正常对照组相比，高糖组、高糖+SB203580组干预ARPE-1924h、45h、72h，细胞内TNF-α表达量明显增加（P<0.01）。②在24h，高糖组、高糖+SB203580组细胞内TNF-α表达量差别无统计学差异（P>0.05）；在48h、72h，高糖+SB203580组较之高糖组TNF-α表达量减少（P<0.05）。③与正常对照组相比，甘露醇组（渗透压对照组）在24h、48h、72h，均不影响ARPE-19细胞TNF-α的表达（P>0.05）。
（3）PEDF：①与正常对照组相比，高糖组、高糖+SB203580组干预ARPE-1924h、48h、72h，细胞内PEDF表达量明显下降（P<0.01）。②在24h，高糖组、高糖+SB203580组细胞内PEDF表达量差别无统计学差异（P>0.05）；在48h、72h，高糖+SB203580组较之高糖组PEDF表达量增加（P<0.01）。③高糖组、高糖+SB203580组在24h、48h、72h细胞内PEDF表达量有先减少后略增高的趋势。④与正常对照组相比，甘露醇组（渗透压对照组）在24h、48h、72h，均不影响ARPE-19细胞PEDF的表达（P>0.05）。
[结论]
①高糖能够抑制人RPE细胞增殖、诱导RPE细胞ROS生成增加。②高糖能够诱导RPE细胞产生线粒体DNA的损伤，同时使DNA糖基化酶hOGG1的表达量减少。③高糖诱导细胞因子TNF-α产生增加，PEDF产生减少。④加入特异性p38-MAPK抑制剂SB203580后，高糖对视网膜色素上皮细胞的上述作用减弱。