聚多巴胺纳米粒子固定化磷脂酶A1及其在山茶油脱胶中的应用

来源 :合肥工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sunningyou
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食用油的酶法脱胶具有安全性高、脱胶彻底、油得率高、废水排放量少等优点,但酶法脱胶仍未得到大规模推广,重要的一个原因就是游离磷脂酶的稳定性较差且难以重复使用,致使生产成本增加,限制了其工业应用。对磷脂酶进行固定化是解决上述问题的有效方法之一。聚多巴胺具有生物相容性良好且表面活性基团丰富等特点,是一种较为理想的酶固定化载体。本文首先合成聚多巴胺纳米粒子(PDANPs),并以其为载体对Lecitase?Ultra进行固定化,再将制备的固定化酶(PDANPs@Lecitase?Ultra)应用于山茶油的脱胶,最后比较了水法脱胶和酸法脱胶和固定化酶脱胶三种方式对山茶油品质特征的影响,为食用油的固定化酶法脱胶的工业化应用提供了一定数据基础。主要结论如下:(1)磷脂酶A1的固定化及固定化酶性质研究。利用多巴胺氧化自聚合制备了PDANPs,,并对其进行Lecitase?Ultra的固定化。结果表明,PDANPs固定化Lecitase?Ultra的较适条件为:酶添加量1.5 m L/10 mg,固定化时间9 h,固定化p H 5,固定化温度30℃,得到的酶活回收率为71.2%,蛋白固载率为78.2%。对PDANPs和PDANPs@Lecitase?Ultra进行透射电镜、傅里叶变换红外光谱、X射线光电子能谱、热重和二级结构分析,表明成功制备了纳米尺寸的PDANPs,且Lecitase?Ultra已成功固定在PDANPs上。与游离的Lecitase?Ultra相比,PDANPs@Lecitase?Ultra的最适p H升高了1个单位,最适温度升高了5℃,p H稳定性、热稳定性和贮藏稳定性显著增强。(2)固定化酶在山茶油脱胶中的应用,并与水化脱胶、酸法脱胶进行比较。山茶毛油固定化酶脱胶的较优工艺参数为:加酶量80 mg/kg山茶油,加水量2%,脱胶时间3 h,脱胶温度55℃,脱胶p H 6,此时脱胶油磷含量降至5 mg/kg内。固定化酶重复使用10次后活性保持57.6%。就水化脱胶油、酸法脱胶油与固定化酶脱胶油的品质分析表明,酸法脱胶油的水分含量和酸价最高,为0.1321 g/100 g和4.57 mg/g,固定化酶脱胶油的水分含量和酸价最低,为0.0853 g/100 g和4.04 mg/g;酸法脱胶油总酚含量(TPC)比水化脱胶油和固定化酶脱胶油分别高4.19%和9.01%;抗氧化性大小为酸法脱胶油>固定化酶脱胶油>水化脱胶油;共鉴定出了山茶油中60种风味物质,固定化酶脱胶油醛类物质含量最高,约占18.20%。山茶油经固定化酶脱胶后,色泽变浅,酸价降低11.01%,TPC损失18.66%,氧化诱导时间提高1.69 h。综上,三种脱胶油品质差异较大,固定化酶脱胶使毛油品质变好。
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