p21WAF1/CIP1作为周期蛋白依赖激酶的抑制剂是细胞周期的重要调节子，其蛋白水平受转录水平和蛋白酶体控制。p21在翻译后易经过泛素依赖和非依赖的途径被蛋白酶体降解，因此蛋白不稳定。目前，p21在转录水平上的调控比较成熟，而p21翻译后水平调控的机制有待进一步研究。在此，我们鉴定了多功能蛋白Nucleophosmin（NPM）/B23能够结合p21并能增强其稳定性。 首先，我们用免疫共沉淀和GSTpulldown方法确定NPM和p21存在物理的相互作用。激光共聚焦观察显示NPM和p21两者在胞浆部分共定位；经过放线菌素D处理细胞，穿梭蛋白NPM从核仁移位于胞浆，并增强了与p21共定位。为了明确NPM和p21相互作用的生化功能意义，首先，我们研究了NPM对p21蛋白半衰期影响：NPM过表达或放线菌素D处理，p21蛋白半衰期延长；而小分子干扰NPM蛋白表达则削弱了由于放线菌素D引起的p21蛋白半衰期的延长。进一步，我们检测了NPM对p21蛋白的泛素化调控：过表达NPM抑制p21蛋白的泛素化水平；相反的，小分子干扰NPM蛋白表达则显著提高p21蛋白的泛素化水平。最后我们探讨了NPM对细胞周期影响：放线菌素D引起HepG2细胞阻滞在G2期；KnockdownNPM细胞阻滞在S期，提示NPM蛋白充当维持放线菌素D引起的HepG2细胞G2期阻滞是必要条件。总的来说，我们提供的数据表明：NPM和p21存在直接相互作用，功能上NPM正向调控p21蛋白稳定。