蝙蝠蛾拟青霉(Paecilomyces hepiali)菌丝体化学成分和药理活性的研究

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本篇论文对蝙蝠蛾拟青霉(Paecilomyces hepiali)菌丝体的5种不同极性的提取物进行了化学成分和抑菌活性的研究;对分离得到1-油酰基-2-亚油酸-3-棕榈酸甘油、石油醚提取物和水提取物进行了体内抗肿瘤活性的研究,并对其抗肿瘤作用的机理进行了初步的探讨。将蝙蝠蛾拟青霉菌丝体干燥粉末按溶剂极性梯度,依次经过石油醚(30-60℃)、氯仿、丙酮、甲醇和蒸馏水提取后,分别得到石油醚提取物、氯仿提取物、丙酮提取物、甲醇提取物和水提取物。化学成分方面,石油醚提取物上清液经过GC-MS分析,结果显示,蝙蝠蛾拟青霉菌丝体石油醚提取物中脂肪酸含量较多,其中主要为亚油酸(9,12-十八碳二烯酸),含量为41.949%、反油酸(反9-十八碳烯酸),含量为27.696%;上清液经过上硅胶柱,分离得到了1个化合物,运用理化检识、核磁共振和质谱等手段进行了结构的鉴定,该化合物为1-油酰基-2-亚油酸-3-棕榈酸甘油。石油醚提取物上硅胶柱,分离得到了4个化合物,运用理化检识、核磁共振和质谱等手段进行了结构的鉴定,分别为:4,6,8(14),22(23)-四烯-3-酮-麦角甾烷、麦角甾醇、β-谷甾醇和麦角甾醇过氧化物;氯仿层提取物上硅胶柱,分离得到了1个化合物,运用理化检识、核磁共振和质谱等手段,鉴定为啤酒甾醇。在甲醇层提取物中分离得到了1个化合物,经过和甘露醇标准品的分析比较,确定该化合物是甘露醇。体外抑菌活性方面,采用纸片扩散测定法对蝙蝠蛾拟青霉菌丝体石油醚提取物、氯仿提取物、丙酮提取物、甲醇提取物和水提取物进行体外抑菌率的检测。结果显示,对金黄色葡萄球菌S.aureusATCC6538的生长方面,石油醚提取物、氯仿提取物和甲醇提取物有一定的抑制作用,但效果较弱;丙酮提取物的抑制作用最强,在200mg/mL时,抑菌率高达60.67%;水提取物有抑制作用,并且抑制作用效果随浓度的增高而减弱。对枯草芽孢杆菌B.subtilis的生长方面,蝙蝠蛾拟青霉菌丝体丙酮提取物有抑制作用,在200mg/mL时,抑菌率高达62.02%;而其它提取物均没有抑制作用。在抑制大肠杆菌E.coliATCC8099的生长方面,石油醚提取物、氯仿提取物、丙酮提取物和水提取物没有抑制作用;甲醇提取物有一定的抑制作用,在200mg/mL时抑菌作用最强,但是抑菌率仅为32.21%。在解淀粉欧文氏菌E.amylovora的生长方面,蝙蝠蛾拟青霉菌丝体各提取物均没有明显抑制作用。体内抗肿瘤活性方面,选用H22肝癌荷瘤小鼠做为动物模型,对分离得到的1-油酰基-2-亚油酸-3-棕榈酸甘油、石油醚提取物和水提取物进行了体内抗肿瘤实验。结果表明,1-油酰基-2-亚油酸-3-棕榈酸甘油没有抗肿瘤活性;石油醚提取物和水提取物都具有明显的抗肿瘤活性。石油醚层提取物在剂量为800mg/kg时,抑瘤率达到59.90%,高于阳性药环磷酰胺(10mg/kg)组的抑瘤率46.97%,并且对H22肝癌荷瘤小鼠的各免疫器官指数具有一定程度的影响,但对血清中白介素2(IL-2)的含量没有明显影响;水提取物在剂量为400mg/kg时,抑瘤率为36.19%,在剂量为800mg/kg时,抑瘤率为45.41%,各免疫器官指数也均有不同程度的增加,白细胞数和IL-2的含量明显增加。
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