【摘 要】
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本研究在2000年分离到的H5N1亚型禽流感病毒中选择了有代表性的一株鸭源KF株和一株鸡源QS株,从病毒的生物学特性角度和HA基因的分子水平对其致病力、抗原性、免疫原性作了比较
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本研究在2000年分离到的H5N1亚型禽流感病毒中选择了有代表性的一株鸭源KF株和一株鸡源QS株,从病毒的生物学特性角度和HA基因的分子水平对其致病力、抗原性、免疫原性作了比较和分析,进行了鸡鸭胚的ELD50、鸡鸭LD50、鸡鸭IVPI、同居感染试验、交叉中和试验和攻毒保护试验,结果显示:鸭源KF株对鸡、鸭胚的ELD50分别为10-8.55/0.1mL和10-8.44/0.1mL,大于相应的鸡源QS株对鸡胚(10-7.5/0.1mL)和鸭胚(10-7.375/0.1mL)的ELD50;鸭源KF对鸡、鸭LD50分别为10-8/0.2mL和10-4.25/0.2mL,明显高于相应鸡源QS对鸡(10-6.47/0.2mL)和鸭LD50(10-2.63/0.2mL);对六周龄鸡和鸭的IVPI值KF分别为2.71和2.66,也远高于QS对鸡(2.1)和鸭的IVPI值(1.83);表明鸭源KF株的致病力大于鸡源QS株。但对于同一毒株来说,对鸭胚的ELD50小于鸡胚,对鸭的LD50、IVPI均小于鸡,表明鸭和鸭胚的抵抗力要比鸡和鸡胚大。交叉HI试验,鸡胚中和试验中两毒株的抗原相关系数均在0.67以上,表明两毒株的抗原性相同。由攻毒保护试验显示,两种毒对KF株疫苗的免疫鸡鸭攻毒可达到80%-100%的保护,而QS株却只能达到75%-80%,表明KF株的免疫原性较QS株好,用于制苗效果较好。通过基因克隆的方法获得了两株病毒的HA全长基因(1.7kb),比较KF和QS的核苷酸序列,发现两者相差11个位点,其中QS的906位的G突变为A,引起该处编码氨基酸的变化,使该处变为SSS从而失去一个糖基化位点,这是否和QS株较KF株的致病力小,免疫原性稍差有<WP=6>关尚待研究。两毒株的HA裂解位点序列均为-RDRRRKKR-,是典型的高致病性毒株,其核苷酸与氨基酸序列同源性分别为99.4%和98.4%,说明两毒株是同一来源的病毒在不同宿主的表现。基因进化分析表明这两毒株与ThaiL/04、香港HK/156/97株均处于欧亚谱系,其核苷酸和氨基酸的同源性分别为96.3%-96.7%和95.2%-95.3%,而且具有226位的Met,但不具有感染人毒株所共有的52位(T)、270位(T)和340位的(E),说明两试验株目前虽不感染人,也有感染人的潜在能力。该研究结果从理论上证实了水禽流感,尤其是鸭流感,在自然界中具有重要的生态学地位和流行病学意义,也为实际生产中H5N1亚型鸭流感的免疫和制苗株的选择提供参考依据,从而为禽流感的扑灭和有效防治提供科学的指导。
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