参麦注射液原料红参炮制工艺优化及体外活性研究

来源 :长春中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pobomud1
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目的:建立一套稳定的红参炮制工艺,为参麦注射液提供优质稳定的红参原料。方法:1.红参的炮制工艺研究(1)正交试验法考察困参浸润、蒸制时间、干燥温度、干燥时间等因素,以困参浸润效果、总皂苷含量为指标,确定红参炮制工艺。(2)高效液相色谱法比较自制红参和市售红参Rg1、Re、Rb1单体皂苷的含量。(3)采用Bradford法比较红参蛋白含量。2.参麦注射液原料药红参对心肌细胞氧化损伤的保护作用过氧化氢(H2O2)诱导H9c2大鼠心肌细胞建立体外心肌细胞氧化应激损伤模型;MTT法检测细胞存活率;试剂盒检测细胞因子LDH释放、SOD活性和MDA含量;流式细胞术检测ROS、细胞凋亡;Western Blot法检测细胞凋亡相关蛋白表达。结果:1.红参炮制工艺为困参3d,润参20min,蒸制时间3h;烘干温度60℃;烘干时间10h。2.炮制后的红参与市售红参对比,皂苷含量稳定均一,且蛋白质的含量相对较低。3.与Control组比较,H2O2能够明显降低细胞存活率,红参有效成分预处理后,心肌细胞存活率显著提高,减轻了H2O2诱导的大鼠心肌细胞氧化损伤。4.与Model组比较,红参干预后显著提高H2O2诱导的心肌细胞的SOD活性,抑制MDA水平升高,同时降低ROS水平。6.与Model组比较,红参干预后促凋亡蛋白Bax下调,抗凋亡蛋白Bcl-2表达上调,Bcl-2/Bax比值升高,表明通过减轻凋亡相关蛋白表达来缓解心肌细胞凋亡。结论:建立了适用于参麦注射剂用的红参的炮制工艺,确保红参产品质量均一稳定。发现参麦注射液原料药红参对H2O2诱导H9c2大鼠心肌细胞氧化应激损伤具有良好的的保护作用。
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