新生血管形成过程包括血管萌芽、分支和分化生长,形成成体器官中成熟的血管模式。这一过程在多种生理和病理条件都是非常重要的。除了正常的雌性生殖循环,成体内的新生血管形成在很大程度上发生在病理条件下,比如伤口愈合、肿瘤生长以及肿瘤转移。而且,研究发现新生血管形成是肿瘤生长和转移所必需的,例如固体瘤的生长需要血管网络的扩张来满足氧和营养的需求。研究人员已经发现了一些重要的新生血管形成分子,像血管生长因子(VEGFs)、成纤维生长因子(FGFs)等。不过,有关肿瘤新生血管形成的分子机制仍有待研究。本论文所研究的Slit蛋白是一类已知的分泌型蛋白,它通过其受体Roundabout(Robo)作为神经轴突导向和神经元迁移的排斥性因子以及白细胞趋化的抑制因子发挥重要的作用。 本论文工作主要利用免疫组织化学染色技术对Slit2/Robo1蛋白在肿瘤新生血管形成中的表达进行一系列的研究。 在本文实验中,通过向T细胞缺陷的裸鼠进行皮下注射肿瘤细胞的方法,建立了小鼠体内肿瘤生长模型。实验发现:通过分别使用Slit2和Robo1多抗的免疫组织化学染色方法,在该模型的A375(人恶性黑色素瘤细胞)肿瘤切片中发现了Slit2和Robo1分别在肿瘤细胞和血管内皮细胞上的阳性染色;同时,在Western-Blot实验中发现了A375表达Slit2,HUVECs(人静脉血管内皮细胞)表达Robo1:有趣的是,在肿瘤生长模型中的抗体抑制实验中,特异性地中和Robo1的活性可以减少小鼠模型中肿瘤的大小和其中新生血管的密度;另外,针对一些人肿瘤组织切片(如结肠癌)的Slit2和Robo1的免疫组织化学染色,也发现了Slit2和Robo1的表达。这些实验结果为证明Slit-Robo信号通路在肿瘤新生血管形成中的促新生血管形成的功能提供了有力的证据。而且,本文的研究也提示了在临床上阻断Slit-Robo这一信号通路有可能成为治疗肿瘤的有效途径。