本文应用内源荧光光谱、荧光相图、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、高效凝胶排阻色谱、激光光散射光谱以及十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳研究了脲和盐酸胍诱导的牛碳酸酐酶B的去折叠和重折叠过程。 在脲和盐酸胍诱导的牛碳酸酐酶B的去折叠过程中，溶液始终保持澄清，没有牛碳酸酐酶B集聚体沉淀产生。内源荧光光谱和荧光相图表明，脲和盐酸胍诱导牛碳酸酐酶B的去折叠过程中分别存在一个和两个中间态；PAGE、高效凝胶排阻色谱和激光光散射光谱分析结果表明，在脲和盐酸胍诱导牛碳酸酐酶B的去折叠过程中，牛碳酸酐酶B在变性液中没有多分子集聚体产生；同时，SDS—PAGE分析结果表明牛碳酸酐酶B二分子集聚体是由单分子牛碳酸酐酶B通过静电和疏水相互作用形成的。 在脲和盐酸胍诱导牛碳酸酐酶B的重折叠过程中，当脲和盐酸胍浓度分别大于1.0mol/L和0.7 mol/L时，溶液始终保持澄清，当脲和盐酸胍浓度分别小于等于1.0 mol/L和0.7 mol/L时，溶液开始出现浑浊。内源荧光光谱和荧光相图表明，脲或盐酸胍诱导牛碳酸酐酶B的重折叠过程中都存在一个中间态；PAGE、高效凝胶排阻色谱和激光光散射光谱分析结果表明，在脲诱导牛碳酸酐酶B的重折叠过程中，当最终复性液中脲浓度大于2.0 mol/L时，牛碳酸酐酶B在复性液中以单分子和二分子集聚体形式存在；当最终复性液中脲浓度小于2.0 mol/L大于1.0 mol/L时，牛碳酸酐酶B在复性液中以单分子、二分子集聚体和少量多分子集聚体形式存在；而当最终复性液中脲浓度小于等于1.0mol/L时，牛碳酸酐酶B在上清和沉淀中达到动态解离平衡，且在两相中都以单分子、二分子集聚体和少量多分子集聚体形式存在。在胍诱导牛碳酸酐酶B的重折叠过程中，当最终复性液中胍的浓度大于0.7 mol/L时，牛碳酸酐酶B在复性液中以单分子和二分子集聚体形式存在；当最终复性液中胍浓度小于等于0.7 mol/L时，牛碳酸酐酶B在上清和沉淀中达到动态解离平衡，且在两相中都以单分子、二分子集聚体和少量多分子集聚体形式存在。SDS—PAGE分析结果表明溶液中二分子和多分子牛碳酸酐酶B集聚体是通过单分子牛碳酸酐酶B之间的疏水和静电相互作用力而形成的。当复性液中这些成分达到一定浓度并且溶液中脲或盐酸胍的浓度小于某一个值时，它们之间才能通过非共价形式形成沉淀。 脲和盐酸胍诱导的牛碳酸酐酶的重折叠过程和去折叠过程是不可逆的，其重折叠过程要比去折叠过程复杂得多。