目的 该研究以骨折愈合不同时期的小鼠骨痂组织为研究对象,观察小鼠胫骨骨折愈合过程的组织形态学变化情况,重点检测骨折愈合中骨痂组织成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)基因的时空表达模式和原位细胞凋亡的发生情况,探讨FGFR3在骨折愈合中可能的作用,探索骨组织石蜡切片的原位杂交技术.方法 野生型昆明白小鼠50只,雄性,6~8周龄,体重22~28g,分为骨折后3d、5d、7d、14d和28d等5个时相点组,每组10只动物.用2.5﹪ Avertin(0.015~0.017ml/g体重)腹腔注射麻醉后,行左侧胫骨髓内钢针内固定术,然后横向剪断胫骨.术后每周行常规X线摄片,分别于骨折后3d、5d、7d、14d和28d等5个时相点以颈椎脱臼法处死小鼠,取出伤侧胫骨,抽出内固定钢针,立即置入4﹪多聚甲醛磷酸缓冲液中固定,0℃,24h.15﹪EDTA(PH7.6)脱钙液中脱钙10~14天.确定脱钙完全后,常规脱水、透明,并做石蜡包埋和切片(6μm),用于原位杂交、原位凋亡检测、TRAP染色和HE染色.对照组取材为同一小鼠右侧未骨折的胫骨.结论 据该实验结果,我们可以得出以下结论:1.发育调节因子FGFR3在骨折愈合中具有重要作用,它主要是通过调节软骨细胞的终末分化而影响骨折愈合.2.骨折愈合包括骨形成和骨吸收两个方面.骨痂破骨细胞的功能是随着软骨内成骨过程的不断发展而逐渐活跃的;FGFR3通过直接调节骨痂软骨细胞的终末分化而促进软骨内成骨,进而间接参与调节破骨细胞的骨吸收功能.3.骨痂中的肥大软骨细胞既是TUNEL阳性凋亡细胞,又是FGFR3 mRNA阳性表达细胞,提示FGFR3主要是通过调节软骨细胞的终末分化而诱导肥大软骨细胞凋亡,从而促进软骨内成骨,最终有利于骨折愈合.