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巨大口蘑Tricholomagiganteum(Massee)是担子菌亚门、层菌纲、伞菌目、口蘑科、口蘑属中的一种珍稀美味食用菌。其子实体具有质地致密,不易生虫或腐烂,耐贮运性好,在8~12℃条件下,保存30d不变色、不变味等特点,开发利用前景广阔。本文对巨大口蘑原种培养基配方进行筛选优化以及定性分析了巨大口蘑子实体的化学成分;初步研究巨大口蘑不同极性提取物对受试细菌和真菌的抑制作用。本文主要研究内容及结果如下:
1、采用均匀设计法筛选巨大口蘑原种培养基,研究不同培养基组分对巨大口蘑菌丝体生长速度的影响,以便获得优化配方。以蔗渣为主料的培养基配方筛选,选择蔗渣(X1),蔗糖(X2),棉籽壳(X3),酵母浸汁(X4),麸皮(X5),豆粕粉(X6),石膏(X7),石灰(X8),磷酸二氢钾(X9),磷酸氢二钾(X10)作为参试因子,每个因素设12个水平。以玉米杆和玉米芯为主料的培养基配方筛选,选择玉米杆(X11),玉米芯(X12),蔗糖(X13),棉籽壳(X14),酵母浸汁(X15),麸皮(X16),豆粕粉(X17),石膏(X18),石灰(X19),磷酸氢二钾(X20)作为参试因子,每个因素设12个水平。两组试验均利用U12(1210)均匀设计表安排实验,以巨大口蘑菌丝体在瓶子中的生长深度作为目标函数(y)对数据进行二次回归分析,利用DPS7.55软件进行统计分析,并通过数学模型模拟,找出使巨大口蘑菌丝生长速度最快的优化培养基配方。
实验结果表明:两组试验得到的二次回归方程均达到0.01极显著水平,两个回归方程的相关系数均为R=1.0000,调整后的相关系数Ra=0.99999,说明方程的可信度好。通过数学模型模拟,得到以蔗渣为主要碳源的巨大口蘑原种培养基优化配方为:蔗渣39.12%,蔗糖0.43%,棉籽壳43.15%,酵母浸汁0.39%,麸皮3.3%,豆粕粉3.52%,石膏1.94%,石灰6.83%,磷酸二氢钾0.62%,磷酸氢二钾0.71%;以玉米杆为主要碳源的巨大口蘑原种培养基优化配方为:玉米杆20.82%,玉米芯24.43%,棉籽壳24.98%,蔗糖9.87%,酵母粉0.98%,麸皮0.09%,豆粕粉12.17%,石膏0.9%,石灰9.84%,磷酸氢二钾0.99%。
2、采用试管系统预试法对巨大口蘑子实体化学成分进行预试试验,结果表明:巨大口蘑中可能含有有机酸、多糖及其苷类、皂苷、黄酮类或其甙类、甾体、萜类、蒽醌及其甙类、内酯、香豆素、氨基酸、多肽和蛋白质、生物碱类、以及挥发油、油脂类等化学成分。
3、采用柱层析和薄层层析分离方法并结合现代仪器分析手段对巨大口蘑乙酸乙酯提取物进行初步分离,跟踪抑菌作用结果表明,得到组分(12—24)及组分(57—58)对受试菌有明显的抑菌作用。通过气质联用仪分析测定此两组分的化学成分,组分(12—24)的主要化学成分为酯类(84.55%),组分(57—58)的主要化学成分为酸类(5.32%)和酯类(30.33%)。
4、采用牛津杯法对巨大口蘑不同极性提取物进行抑菌试验,并通过气质联用仪分析测定了挥发油、乙醚提取物的化学成分,结果表明,乙醚提取物、乙酸乙酯提取物以及挥发油对供试菌大肠杆菌(Escherichiacoli)、沙门氏菌(Salmonella)、苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis)、枯草芽胞杆菌(Bacillussubtilis)、金黄色葡萄球菌(Staphalococcusaureus)五种供试细菌有很强抑制作用;对青霉(Penicillium)、黑曲霉(Aspergillusniger)、桔青霉(Penicilliumcitrinum)、啤酒酵母(Saccharomycescerevisiae)、红酵母(Rhodotorula)五种供试真菌也有较强的抑制效果。乙醚提取物中的主要化学成分为酸类(61.15%)和酯类(28.01%)。挥发油中的主要化学成分为烷烃(31.74%)和酯类(19.01%)。