桑葚花色苷对糖代谢的调控作用及其机制研究

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花色苷是一类广泛分布于植物界的水溶性多酚类色素,有研究表明长期食用花色苷可降低糖尿病和肥胖发生的风险、保护神经系统、减少炎症和心血管疾病发生的概率、阻止和抑制肿瘤的发生等,对人的健康有积极的作用。桑葚是一种富含花色苷的浆果,可以作为日常的食用水果或者果酒、果汁、果酱、罐头等食品的原料。据记载桑葚对贫血、冠心病、高血压等病症具有辅助治疗功效,但是关于桑葚花色苷调节血糖方面少有报道,因此探究桑葚花色苷对糖代谢的调控作用具有重要意义。本论文以桑葚果实为材料,利用人肝细胞、糖尿病小鼠和秀丽隐杆线虫模型,综合评价桑葚花色苷的降糖活性,得到如下结果:1、分离提取得到桑葚花色苷,该提取物中含有矢车菊素-3-葡萄糖苷472±9.23 mg/g、矢车菊素-3-芸香糖苷273 ± 5.12 mg/g和花葵素-3-葡萄糖苷14 ±0.29 mg/g。DPPH和 ABTS 的 IC50 值分别为 283 ± 2.75 μg/mL 和 275 ± 3.56 μg/mL。2、桑葚花色苷可以提高肝细胞的葡萄糖消耗量和摄取量及糖原含量,抑制糖异生相关蛋白的表达,促进糖原合成相关蛋白的表达。3、利用高糖和棕榈酸共同刺激HepG2细胞,诱导细胞形成胰岛素抵抗。桑葚花色苷可以恢复细胞的葡萄糖消耗和摄取量以及糖原含量,降低糖异生相关酶活性。这可能与桑葚花色苷激活PI3K/AKT和AMPK信号通路有关。4、利用过氧化氢或高糖/棕榈酸刺激HepG2细胞,诱导细胞形成氧化应激。桑葚花色苷可以激活Nrf2和p38MAPK、抑制JNK磷酸化,增加细胞抵抗氧化损伤的能力,减缓氧化应激对胰岛素信号转导的影响,维持葡萄糖的正常代谢。5、利用db/db糖尿病小鼠模型,灌胃剂量为50 mg/kg BW/day和125 mg/kg BW/day的桑葚花色苷8周后,小鼠的血糖水平显著降低,口服糖耐量升高。血清中甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白、糖化血清蛋白、胰岛素、瘦素水平下降,脂联素水平上升;肝脏中甘油三酯和糖原的含量降低,肌糖原的含量增加。桑葚花色苷可以下调糖尿病小鼠脂肪组织中炎症因子的表达、上调肝脏、肌肉和脂肪组织中AKT和AMPK的表达,对糖尿病的改善起到积极的作用。6、利用秀丽隐杆线虫模型,对线虫的生命活动规律进行评价。桑葚花色苷可以延长秀丽线虫的寿命、阻止百草枯和高糖环境下秀丽线虫寿命的缩短及代谢异常,而对于线虫的保护作用在daf-16(-)中均没有体现,说明桑葚花色苷可以通过激活DAF-16/FOXO以延长线虫的寿命。7、对高糖培养和加入桑葚花色苷的高糖培养下的秀丽线虫进行转录组分析。花色苷干预后影响的信号通路涉及到线虫的脂肪代谢、细胞过程、生长、衰老和代谢过程等。
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