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目的:肾透明细胞癌（ccRCC）的两大特点是大量的脂滴积聚和缺氧诱导因子（HIF）信号通路的持续性激活。然而,ccRCC脂代谢紊乱的分子机制尚不清楚。脂肪酸受体CD36介导长链脂肪酸、氧化脂质和磷脂的结合和摄取,并在脂质积累和能量重编程中发挥着重要作用。近几十年来,越来越多的证据表明,CD36也参与了肿瘤发生的调控。在本研究中,我们旨在探索CD36在ccRCC中的表达情况及CD36对ccRCC进展的影响,为阐明ccRCC发展的分子机制提供一定的理论依据。方法:第一部分:检索TCGA（The Cancer Genome Atlas）数据库中的六种代谢相关性肿瘤,包括结肠癌（COAD）,前列腺癌（PRAD）,肝细胞癌（LIHC）,胰腺癌（PAAD）,乳腺癌（BRCA）,肾细胞癌（RCC）,分析CD36的表达情况;下载ccRCC、嫌色细胞性肾细胞癌（chRCC）和乳头状肾细胞癌（pRCC）三种肾细胞癌亚型癌组织和癌旁组织mRNA数据,分析CD36在正常组和病例组的表达情况;检索Oncomine数据库,分析CD36在六个ccRCC数据集的表达情况;使用实时荧光定量PCR（qPCR）和Western blot实验分析正常肾细胞293T和肾透明细胞癌细胞786-O、A498的CD36mRNA和蛋白水平。第二部分:使用CD36小干扰RNA（si CD36）干扰786-O细胞和A498细胞,使用Western blot实验验证敲低效率。采用CD36慢病毒构建CD36 OE细胞,采用Western blot实验验证病毒转染效率。采用C-16摄取实验检测细胞摄取游离脂肪酸的能力变化。采用Bodipy实验和油红O实验检测干扰或过表达CD后脂滴沉积变化。采用CCK-8实验和Transwell迁移实验检测干扰或过表达CD36后细胞的增殖和迁移能力变化。使用DGAT1抑制剂处理786-O细胞,检测CD36OE细胞使用DGAT1抑制剂处理后的脂滴变化以及增殖和迁移能力变化。第三部分:从NCBI（National Center for Biotechnology Information）网站查询CD36基因启动子上游2000kb范围的序列,并筛选是否含有HRE反应元件（CGTG）。首先将CD36相应元件序列构建入报告基因载体,检测干扰HIF-2α或者不干扰HIF-2α的条件下,其荧光素酶活性,即下游信号通路的响应情况。分别使用缺氧诱导剂DMOG和HIF-2α抑制剂PT2385处理786-O细胞,使用qPCR和Western blot实验检测CD36mRNA和蛋白的表达情况,采用C-16摄取实验检测细胞摄取游离脂肪酸能力,采用Bodipy实验检测细胞处理后脂滴的沉积情况,采用CCK-8实验和Transwell迁移实验检测786-O细胞处理后的增殖和迁移能力变化。在DMOG诱导的缺氧条件下,干扰CD36,使用Bodipy实验、CCK-8实验和Transwell迁移实验观察对786-O细胞脂滴、增殖和迁移的变化。结果:第一部分:TCGA数据库结果显示,与癌旁组织相比,CD36mRNA表达量在肾细胞癌病人中升高了2.26倍。并且在肾细胞癌三种亚型中,CD36表达量在chRCC和pRCC病例中均较对照组下降,但CD36在ccRCC中的表达量是对照组的5.2倍。检索Oncomine数据库,结果显示,CD36在六个ccRCC数据集中均高表达。并且与正常肾细胞293T相比,786-O和A498细胞中CD36mRNA和蛋白均高表达。第二部分:western blot实验显示,CD36敲低细胞和CD36过表达细胞系构建成功。C-16摄取实验结果显示,干扰CD36抑制细胞脂肪酸摄取能力,而过表达CD36细胞摄取能力增加。Bodipy实验结果显示CD36敲低后,786-O和A498细胞脂滴减少,油红O实验结果显示过表达CD36促进脂滴积聚。CCK-8实验和Transwell迁移实验显示,CD36敲低细胞增殖和迁移能力下降,而过表达CD36促进细胞增殖和迁移。使用DGAT1抑制剂处理CD36过表达细胞,结果发现,DGAT1抑制剂可以阻断CD36过表达导致的脂滴、增殖和迁移能力增加。第三部分:成功筛选出CD36的启动子有3个潜在的HRE元件,双荧光素酶报告分析实验结果显示,与对照组相比,siHIF-2α组荧光素酶活性下降,下游信号通路响应减弱。在缺氧条件下,qPCR和Western blot实验显示786-O细胞CD36mRNA和蛋白上调,而使用PT2385处理后,CD36水平下调。缺氧条件下,C-16摄取实验显示细胞摄取能力增加,Bodipy实验结果显示脂滴积聚增加,CCK-8实验和transwell迁移实验结果显示细胞增殖和迁移能力增加,而干扰CD36可以阻断缺氧刺激下的细胞的脂滴增加、增殖和迁移能力的升高。结论:我们发现脂肪酸受体CD36在人类ccRCC组织和ccRCC细胞系中高表达。CD36的过表达促进脂肪酸的摄取和脂滴的形成,从而增强了ccRCC细胞的增殖和迁移。相反,干扰内源性CD36显示出相反的效果。CD36在ccRCC中的上调表达与缺氧诱导的HIF-2α的激活有关。此外,我们发现CD36是转录因子HIF-2α的一个新靶点。敲除ccRCC细胞中的CD36可以阻断缺氧时HIF-2α诱导的肿瘤促进作用。我们的研究结果表明,缺氧依赖的HIF-2α通过CD36促进脂质代谢的重塑和ccRCC的进展。