一株脱氮盐单胞菌的应用效果及环境条件对一株假交替单胞菌的脱氮影响

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1.5株脱氮菌的脱氮性能比较选取了5株具有脱氮潜能的菌株(盐单胞菌04、盐单胞菌02、盐单胞菌20、鲍曼氏菌03和白翎芽孢杆菌04),分别接种在氨氮及亚硝基氮浓度均为20mg/L的硝化及去亚硝酸盐培养基中,分析5株菌脱氨氮及亚硝基氮效果,结果表明,盐单胞菌04和盐单胞菌02两株菌在20h的氨氮去除率均可达到100%,盐单胞04及盐单胞02对培养基中亚硝基氮100%去除所需的时间分别为60h与72h;进一步分析比较盐单胞菌04与盐单胞菌02在硝化及去亚硝酸盐培养基中培养时,稳定期后的氨单加氧酶(AMO)、羟氨氧化酶(HAO)和亚硝酸盐还原酶(NIR)三种脱氮相关酶活力大小,结果表明,盐单胞04的三种脱氮相关酶活力高于盐单胞菌02。综合分析表明,盐单胞菌04为一株既能代谢氨氮又能代谢亚硝基氮的高效脱氮菌株,在水产养殖中具有潜在的开发价值。2.盐单胞菌04(Halomonas)对高浓度有害氮的去除效果为了研究脱氮盐单胞菌04的应用潜能,设置养殖水体中盐单胞菌浓度分别为0、10~4、10~5及10~6CFU/ml的浓度组,每天向各浓度组中分别添加浓度为10mg/L的氨氮、5mg/L的亚硝基氮及10mg/L氨氮与5mg/L亚硝基氮混合物,按照C:N=15的浓度向实验组及对照组中添加蔗糖,通过分析水体中氨氮及亚硝基氮浓度,统计对虾的存活率,确定盐单胞菌04的脱氮能力。实验结果显示,养殖系统中添加盐单胞菌04,能显著降低水体中的氨氮、亚硝基氮的浓度,提高对虾的存活率,最高氨氮去除率10~5CFU/ml+蔗糖组组,氨氮去除率63%,最高亚硝基氮去除率10~6CFU/ml+蔗糖组,亚硝基氮去除率84.8%。向养殖环境中添加蔗糖培养生物絮团,有利于水体中盐单胞菌04去除氨氮和亚硝基氮,提高对虾在氨氮和亚硝酸盐胁迫下的成活率,且对盐单胞菌04的定殖有促进作用。3.盐单胞菌04在模拟养殖环境中的定殖效果为了研究脱氮盐单胞菌04在养殖系统中的定殖效果,以从对虾养殖系统中分离的假交替单胞菌(Pseudoalteromonas.sp)、地衣芽胞杆菌(B.licheniformis)、副溶血弧菌(V.parahaemolyticus)、希瓦氏菌(Shewanella.sp)为模拟环境菌,按照2.5kg/m~2的对虾产量投放饵料,研究了脱氮盐单胞菌04在对虾养殖前期10d内及养殖后期10d内的定殖效果。结果表明,养殖前期,仅有盐单胞菌04存在时,在水体中残饵浓度较低的情况下,盐单胞菌浓度能够维持在10~4CFU/ml数量级水平,养殖后期随着残饵浓度提高,盐单胞菌能够达到在10~5CFU/ml数量级水平。环境中存在多种菌时,影响盐胞菌04的定殖,无论是否存在饵料,菌的浓度仅能维持在10~3CFU/ml的数量菌。4.环境条件对一假交替单胞菌的脱氮效果影响从对虾养殖池中分离得到一株具有高效脱氨氮能力的菌株(06假交替单胞菌),设置不同的C/N、p H、盐度的脱氮培养基,分析了环境条件对其脱氮效率的影响,研究了碳源葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、丁二酸钠、柠檬酸钠、乳糖和可溶性淀粉对06假交替单胞菌脱氮效果的影响。结果表明,06假交替单胞菌在C/N 15~20、p H7~8及盐度5~15时具有良好的脱氨氮效果,应用柠檬酸钠为碳源,氨氮去除率达到100%。在脱氮培养过程中,细菌生长与脱氮效率成强相关性(相关系数r=0.94)。根据06假交替单胞菌的16S r RNA序列构建进化树,结果显示该菌与河豚毒素假交替单胞菌(Pseudoalteromonas tetraodonis)亲缘关系最近,采用浸泡攻毒的方法测试了该菌对虾幼虾的生物安全性,结果显示该菌对幼虾的LC50为7.5×10~7CFU/ml,表明该菌对对虾不具致病力。研究结果可为该菌的开发利用提供技术支持。
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