中国梅丛枝菌根真菌多样性研究

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梅是中国特产的著名果树和花木,是我国自然状况下最早开花的木本花卉,栽培与应用历史悠久,野生分布于我国南方十五省(区),引种栽培几乎遍及中国大部分地区。本项目研究梅形成共生菌根的丛枝菌根真菌(AMF)多样性,通过采集主要野生分布区和栽培区的梅根系和根际土壤,应用染色镜检法测定根系的侵染、形态学方法鉴定丛枝菌根真菌种类、分子生物学方法检测丛枝菌根真菌居群多样性,研究结果探清梅共生菌根的类型、AMF菌根真菌种类、生态分布等规律和特点,取得一系列的创新性研究成果,对于梅的栽培、花果品质改良、生理与生态学研究都有着重要的理论与实践意义。主要研究结果如下:1、本研究首次确定梅的丛枝类型为疆南星型(Arum-type),无隔胞间菌丝直径2~12μm,泡囊形状多种、以椭圆形为多、直径10~120μm,侵入菌丝有单菌丝、多菌丝、匍匐菌丝等形式。以直径小于0.5mm的细根测定侵染率,其值为8.39~32.22%,不同地域取样的根系AM侵染率呈极显著差异;在不同季节中,春季的梅根系AM侵染率、侵入点、泡囊和丛枝均高于其它季节的。2、根据孢子形态特征鉴定,从梅根际土壤中分离得到AMF种类99个种,分属于11属,属数占世界属总数的81.8%;鉴定种类89个,种数占全世界已知种总数的43.0%;其它还有10个为未描述种。其中拟定新种2个(梅花球囊霉Glomus mume和刺环孢囊霉Kuklospora spinosa)、中国新记录种20个,而且环孢囊霉属Kuklospora、类球囊霉属Paraglomus和内生球囊霉属Intraspora为中国首次报道的三个属,极大地丰富了中国AMF种质资源,这是我国报道AMF资源种类最多的一次。3、从11个采样地点分离得到AMF 99种,其中G.claroideum和G.geosporum在所有采样地点均有分布,属于广分布种;G.mosseae和G.rubiforme 2个种在10个采样地点中有分布,分布较广;有39个AMF种仅在1个采样地点中分离得到,占总种数量的39.4%,分布在1-2个采样地的AMF种类累计为63种,占总数的63.6%,这些种均是分布区域较狭窄的种类。4、野梅根际土壤中AMF种类为32-38种/样地,而栽培梅园分离得到的AMF种类为19-25种/样地。梅自然分布中心--藏、川、滇的根际土壤中AMF多样性指数分别为2.68、2.62、2.53,是研究区域中最高的三位。根据AMF多样性指数、孢子密度、种丰度、种数、属数进行聚类分析,可划分为四类。5、在所调查的范围内,梅根际土壤的AMF多样性指数(H)随海拔上升而增多、随经度升高而降低;孢子密度(SD)也是随着海拔上升而增多、野生梅土壤的孢子密度明显高于栽培梅的;种丰度(SR)在黄壤、棕壤、红壤、黑壤中递增,随着有机质、全氮、有机氮的增多而升高。通径分析表明,对梅根际土壤AMF孢子密度、种丰度和多样性指数起直接效应的只有经度(x1)、纬度(x2)、海拔(x3)、pH(x4)、全磷(x5)、有机磷(x6)、有机氮(x7)等7个因素,根据这7个因素的效应,可建立多元线性回归方程:H=50.085-0.025 x1+0.006 x2+0.0000515 x3-0.031 x4+0.18 x5+0.0000562 x6SD=5710.333+0.342x1-70.884x2+0.088x3-170.629x4-1080.973x5-0.602x6-0-158x7SR=-300.776+00.299x1-0.131 x2+0.002 x3+0.754 x4+00.934 x5-0.01 x6+0.011 x76、在极端生态条件下,梅根际土壤的AMF群落表示出一定的特异性。贵州喀斯特地区的AMF种类以具孢子果的小孢子种类相对较多、西藏林芝地区以无梗囊霉属的种类居多。7、北京地区在四个季节中,梅根际土壤的AMF种类:春季17种,夏季16种,冬季12种,秋季为10种、最少;多样性指数:秋季>夏季>春季>冬季;各个季节的根际土壤AMF种的差异较大,春季与夏季的种相似性系数最大为0.42,而冬季和秋季的种相似性系数最低仅为0.27。从武汉梅园的春、秋季AMF群落组成变化和藏东南地区野梅的花、果期AMF群落组成变化来看,春季(花期)的AMF多样性指数高于夏季(果期)或秋季。8、以武汉春季采取的梅根际土壤和根系样品,通过nested PCR的AFLP分子标记分析,得知土壤的AMF基因组DNA多态性位点为6.5个,明显多于根系内的3个位点。其中土壤的AMF基因组DNA多态性位点数与孢子形态鉴定的种类数量基本吻合。根据AFLP标记结果聚类,梅品种根系内AMF基因组DNA的聚类类别与梅品种的“品种群”这一分类级别无相关关系。
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