SGO1在膀胱尿路上皮癌中的表达情况及临床意义

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目的:在公共数据库的肿瘤基因组学数据中,筛选膀胱癌中差异表达的m RNA,为膀胱癌的诊断、治疗和预后寻找新的靶点。并对筛选出的SGO1基因进行临床病理相关性分析。检测SGO1在临床收集的膀胱癌及癌旁组织标本中的表达水平。细胞实验探讨SGO1对膀胱癌细胞的影响以及作用途径。为临床应用提供方向。方法:收集GEO数据库、TCGA数据库以及高通量测序结果中的膀胱癌内基因表达数据,应用SPSS、GEPIA等分析软件筛选差异基因并根据Pearson相关系数搜索膀胱癌中的相似基因,mi Rwalk预测信号通路。使用单因素方差分析对差异基因进行临床相关性分析。收集16例膀胱全切患者的膀胱癌及癌旁组织,通过realtime-PCR对组织样本中的SGO1表达水平进行验证。敲除T24细胞中的SGO1基因,对照组使用空载体转染,realtime-PCR及western blot检测SGO1的敲低效率和相关蛋白表达量。CCK8实验和EDU实验分析SGO1的敲低对膀胱癌细胞增殖能力的影响以及对细胞周期的干扰情况。结果:1、GEO数据库中表达情况存在显著差异的基因72个。2、多数据库中膀胱癌内表达水平存在显著差异的基因15个,其中SGO1在膀胱癌组织中高表达(P<0.01),且目前在膀胱癌中尚无相关研究。3、膀胱癌患者中SGO1 m RNA表达水平与肿瘤分级及患者性别显著相关(P<0.01)。4、SGO1在膀胱癌中的主要富集于细胞周期,表达情况相似的蛋白有CDK1及MCM3。5、离体膀胱癌组织内,SGO1较癌旁组织表达显著上调(P<0.05)。6、si RNA转染后SGO1的敲除效率为75%。7、CCK8显示24h后实验组T24细胞活力明显下降(P<0.05),48h后显著下降(P<0.001),8、EDU提示沉默SGO1后处于有丝分裂期的T24细胞比例下调(P<0.001)。9、western blot提示MCM3和CDK1的表达水平随SGO1的下调而下降(P<0.05)。结论:SGO1在组织标本中的表达情况与生物信息分析结果基本一致,在膀胱癌组织中过表达。体外沉默SGO1的表达能显著抑制T24细胞的增殖能力,下调细胞周期中关键蛋白MCM3和CDK1的表达,符合单基因信号通路预测结果。SGO1的过表达可能通过稳定膀胱癌的有丝分裂能力,调控细胞周期,促进膀胱癌的增殖,可能作为膀胱癌诊断、治疗以及预后评估的新靶点。
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