海洋中生存着种类繁多的微生物，是获取各种天然活性物质的宝贵资源。近几年，极端微生物已经成为微生物学领域的研究热点。低温微生物是极端微生物的一种，在海洋中广泛分布，是研究在生物低温适应性的重要材料，也是低温酶类的重要来源。研究低温微生物及其产生的低温酶有重要的生物学意义，同时，低温酶在低温下具有较高的催化效率，在生物工程领域具有很好的应用前景，已引起各国研究者的广泛关注。本文从青岛海虾的肠道内分离到一株产低温蛋白酶的海洋低温菌，并对该菌分泌的低温蛋白酶进行了分离纯化和性质鉴定，结果如下： 1．菌株的分离筛选及鉴定从青岛海虾的肠道内分离到了产低温蛋白酶的菌株QD485-1，为革兰氏阳性微球菌，实验测定了该菌的16S rDNA，在系统发育树中，该菌与Micrococcus thailandicus和 Micrococcus luteus的亲缘关系较近，结合菌体形态学特征，将其鉴定为微球菌属 (Micrococcus sP．)。 2．菌株QD485-1的产酶条件的优化产酶条件研究显示，QD485-1最适产酶温度20℃，培养基最适初始pH为7-9，酪蛋白适宜浓度是10g/L。 3．低温蛋白酶的纯化经过硫酸铵沉淀，Cellulose DE-52离子交换柱层析，得到纯酶。纯化后的蛋白酶比活力达到1657.9U/mg，酶活回收率为10.5％。 4．纯酶性质 通过SDS-PAGE结果估算出低温蛋白酶分子量约为45KD。该酶具有低温蛋白酶的特点，酶促反应最适温度为30℃，低于40℃范围内稳定；最适pH为9；Mn<2+>对该酶有强的激活作用，Zn<2+>、Ag<+>、Fe<3+>对该酶有强的抑制作用；阴离子表面活性剂SDS对蛋白酶活性几乎没有影响，非离子型表面活性剂吐温80对蛋白酶活性影响较小，蛋白变性剂尿素对蛋白酶的活性反而起促进作用；丝氨酸残基专一性抑制剂PMSF以及金属离子螯合剂EDTA对该酶有强的抑制作用；根据该酶的生化性质，判断其为金属离子激活的丝氨酸蛋白酶。 低温催化是国内外科技工作者研究的热点。本文旨在发现一种高活性的低温蛋白酶，为工业发展提供良好的材料。