日本结缕草ABA途径对盐胁迫响应分子机制

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土壤盐碱化是草坪草常遇到的自然逆境之一,结缕草(Zoysia)是一种耐盐碱能力较强的暖季型草坪草,本研究从分析结缕草盐胁迫转录组入手,筛选鉴定其盐胁迫应答相关基因,从转录组水平揭示日本结缕草(Zoysiajaponica Steud.)适应盐胁迫环境的分子机制,为植物耐盐性分子育种提供一定的理论基础。诸多研究表明,ABA途径与植物的抗盐性密切相关,本研究针对结缕草盐胁迫转录组分析ABA生物合成途径中及其信号转导路径的基因,共有1455条Unigenes可以比对上GO数据库,建立了 73条ABA合成和调控的对应关系,其中有798个上调和647条下调Unigenes。响应于ABA的GO注释一共有65条Unigenes,充分验证了 ABA在结缕草应答盐胁迫下有着重要调节作用。进一步通过KEGG注释分析将ABA合成追溯到植物基础代谢糖酵解、萜类化合物生物合成和类胡萝卜素合成的主线路上的各个基因,在糖酵解合成的50个pathway中,本研究追溯到有421个Unigenes富集在24个pathway中;萜类化合物合成途径的47个pathway中追溯到106个Unigenes富集在24个pathway;类胡萝卜素合成途径的50个pathway中,追溯到35个 Unigenes 富集在 16 个 pathway。根据胁迫相关差异基因表达量变化,筛选了 5个差异表达Unigenes,分别为合成途径上的NCED的comp223195_c0,信号转导路径上的PYR/PYL/RCAR蛋白的comp224310_c0,PP2C的comp210872_c0、comp178903_c0和SnRK2 的comp235482_c0。经qRT-PCR检测,5个基因的的表达模式与RNA-Seq分析结果一致。具体如下:1)comp223195_c0在盐胁迫前期叶片和根部的差异不明显,萎蔫时期叶片的表达量增多差异较大,推测与盐胁迫萎蔫期叶片ABA含量有关,说明此时在叶片中大量ABA合成。根部的表达量呈现对应上调,但是变化量较小。2)PYR/PYL/RCAR蛋白基因comp224310_c0在盐胁迫2h时表达量最多,整个胁迫过程叶片中呈现上调,而根部表达量均较低,且呈现下调情况。因此我们推测整个胁迫过程中,叶片中受此基因调控的与ABA结合的PYR/PYL/RCAR蛋白较多。3)PP2C的两个基因comp210872_c0和comp178903_c0不管在叶片还是根部的表达量趋势都显示了下调模式,其中comp178903_c0的表达量在叶片中先下调后上调,与根部调控模式正相反,因此可能不属于A类PP2C基因,或下调时期参与了激活SnRK2的过程。4)SnRK2基因comp235482_c0的表达量显示上调。推测渗透胁迫激活了 SnRK2基因的高度表达,从而正调控植株的耐胁迫能力。
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