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山楝(Aphanamixis polystachya(Wall.)R.N.Parker)为被子门楝科山楝属植物,广泛分布于孟加拉国、印度和印度尼西亚等热带和亚热带地区,我国生长于广东、广西、云南等省区,是一种乔木植物,高10-15 m,叶为奇数羽状复叶,有时为偶数羽状复叶,长20-60 cm,有小叶12-21片,为椭圆形,长17-26 cm,宽6-10 cm,先端渐尖而钝,最下部的小叶较小,卵形,基部圆形,侧脉13-20对,于近边缘处连结,小叶柄粗壮,长3-8 cm,花为球形,种子为黑褐色扁圆形,直径1.3-1.5 cm,山楝的根、茎皮、叶、果实和种子作为传统中药在我国云南及周边地区和其他国家被广泛使用,树皮可用来止血,种子用于治疗癌症、肝脏、脾脏及腹部不适,叶子可用来杀菌和驱虫、治疗风湿、类风湿和四肢麻木等疾病,从山楝中分离得到的二级代谢产物主要包括三萜、二萜、倍半萜、甾体、黄酮和木脂素等。目的:为了进一步研究植物山楝的二级代谢产物,本课题以山楝小枝为研究对象,以硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱色谱、制备薄层色谱、制备型液相色谱等多种色谱学方法,并结合薄层色谱化学检识,液相色谱分析,质谱分析的方法,对其化学成分进行系统有效的分离,应用紫外(UV)、红外(IR)、质谱(MS)以及核磁(~1H-NMR、13C-NMR、~1H-~1H COSY、HMBC、HSQC、NOESY)解析化合物的结构,并筛选其生物活性,以期发现具有明显生物活性的单体化合物,为新药研发提供结构基础。方法:取阴干粉碎的山楝小枝约5 kg,用95%乙醇冷浸提取三次,合并三次乙醇提取液后于旋转蒸发仪减压浓缩至膏状,得到浸膏810 g,将浸膏均匀悬浮于蒸馏水中,依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,萃取液浓缩后得石油醚相浸膏123 g,乙酸乙酯相浸膏174 g,正丁醇相浸膏467 g。采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、制备薄层色谱和制备型高效液相色谱法对乙酸乙酯相浸膏分离纯化,得到的单体化合物采用UV、IR、~1H-NMR、13C-NMR、~1H-~1H COSY、HSQC、HMBC、NOESY等技术进行结构鉴定,研究单体化合物体外抑制肿瘤细胞增值活性。结果:通过对山楝小枝乙酸乙酯相浸膏系统分离,共得到18个化合物(新化合物1个),包括1个苯乙酸苷类化合物,1个香豆素苷类化合物,3个醌类及其苷类化合物,8个黄酮及其苷类化合物,5个木脂素及其苷类化合物。结构鉴定结果如下:Cinnacassides F(1),9-β-Xylopyra nosyl-(-)-isolariciresinol(2),(-)-Secoisolariciresinol-9-O-β-D-xy-lopyranos ide(3),Schizandriside(4),[(1S,2R,3R)-1,2,3,4-tetrahydr-o-7-hydroxy-1-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)-3-(hydroxymethyl)-6-meth-oxy-2-naphtha lenyl]methyl-β-D-Glucopyranoside(5),[(1R,2S,3S)-1,2,3,4-tetr-ahydro-7-h ydroxy-1-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)-3-(hydroxymethyl)-6-methoxy-2-naphthalenyl]methyl-β-D-Glucopyranoside(6),10-Hydro-xyal-oin B(7),10-Hydroxyaloin A(8),Puerarin(9),6-(D-Glucop-yranos-yloxy)-7-h ydroxy-2H-1-benzopyran-2-one(10),Luteolin(11),D-iosm-etin(12),Myricetin(13),3-[4-(D-Glucopyranosyloxy)phenyl]-5,7-dihydroxy-4H-1-benzopyran-4-one(14),1-[2-(β-D-Galactopyranosyloxy)-4,6-dihydroxyphe nyl]-3-(4-hydroxyphenyl)-1-propanone(15),7-hydroxy-5-methyl-2-(2-oxo propyl)-8-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxyl-methyl)oxan-2-yl]chromen-4-one(16),10-β-D-glucopyranosyl-1,8-dihyd-roxy-3-(hydroxyme thyl)-9(10H)-An-Thracenone(17),Silybin(18)。对化合物1-18进行抑制肿瘤细胞增殖活性筛选,当给药浓度为10-6mol/L时,化合物10、11对HT-29细胞的抑制率为49.6%和34.3%,其余化合物对HT-29细胞的抑制率均在30%以下,无明显抑制肿瘤细胞增殖活性。结论:本课题通过各种分离手段,对山楝小枝乙酸乙酯提取物进行了系统分离,共鉴定18个化合物的平面及立体结构。其中包括1个苯乙酸苷类化合物,1个香豆素苷类化合物,3个醌类及其苷类化合物,8个黄酮及其苷类化合物,5个木脂素及其苷类化合物。当给药浓度为10-6mol/L时,化合物10、11对HT-29细胞的抑制率为49.6%和34.3%。其余化合物对HT-29细胞的抑制率均在30%以下,无明显抑制肿瘤细胞增殖活性。