MicroRNA（miRNA）是近年来发现的一种几乎存在于所有真核生物中的内源性非编码RNA,可以调控几乎所有的细胞通路,在许多疾病中发挥着重要作用。然而,裸露的miRNA在外部和内部环境中都极其容易被核酸酶降解,很难直接进入细胞。因此,亟需制备一种低细胞毒性的、高细胞相容性、高转染效率且价格低廉的基因载体。壳聚糖（chitosan,CS）,一种天然的阳离子多糖,在自然界中储量极为丰富,来源广泛,可生物降解,而且可以保护mi RNA免受核酸酶的降解,被认为是一种很有前途的核酸递送载体。泡型棘球蚴病（alveolar echinococcosis,AE）,一种由多房棘球蚴（E.multilocularis,Emu）引起的重要的人畜共患病,由于干预措施有限,严重危害着人类的健康。emu-mi R-4989-3p是多房棘球蚴囊泡中的“毒力”因子之一,可能在AE的发病机制中发挥重要作用,而且emu-mi R-4989-3p还可能参与宿主与寄生虫间的相互作用。本文合成了一种用于miRNA递送的壳聚糖纳米粒子（CSNPs）,研究了其物化性质,评价了其作为转染试剂的可行性并将其应用于多房棘球蚴的研究中。本论文主要有以下四部分组成:第一章介绍了壳聚糖、miRNA及多房棘球蚴病的现状,归纳了壳聚糖递送mi RNA的研究进展,强调了壳聚糖在多房棘球蚴研究中的应用潜力。第二章以三聚磷酸钠（Sodium tripolyphosphate,TPP）为交联剂,采用离子交联法制备了不同配比的壳聚糖纳米粒子（chitosan nanoparticles,CSNPs）,研究了CS与TPP配比对CSNPs形貌、粒径、结合性与负载能力、细胞毒性、包封率、释放率的影响,并探索了温度和p H值对CSNPs稳定性的影响以及结合时间对CS-mi RNA复合体形成的影响。结果显示,配比为10:1的CSNPs平均粒径约150 nm,展现出较高的包封率（69.62%）以及与mi RNA良好的结合性,在24小时时释放率可达90%,具有更低的细胞毒性。此外,CSNPs在-80℃,PBS缓冲液中可长期储存,经多次冻融循环粒径及形貌未出现明显变化,而且在p H=4-10范围内结构几乎未被破坏。结合时间分析中发现随着结合时间的增加CS-mi RNA粒径变小,结合15分钟为最佳条件。第三章采用MTT实验及CLSM表征,研究了CSNPs作为转染试剂的可行性,并通过与脂质体对比研究了CSNPs在细胞毒性及转染效率的表现。结果表明,CSmiRNA经胞吞作用进入细胞,在转染24小时时细胞摄取率达到最高,具有广谱性,能被三种细胞系（RAW、AML12、293T）内化,且细胞摄取效率几乎没有差异;对比试验结果显示,CSNPs在肝实质细胞（HC）和Kupffer细胞（KC）组表现优于脂质体（liposome,LPS）试剂。转染24小时后,LPS组及CS组细胞摄取率即内化率相当,CS组内化率约为88.7%,而LPS组约为90.9%。第四章通过静电相互作用合成了CS-miR-4989复合体,研究了其在多房棘球蚴体内外研究中的作用,此外,合成并尾静脉注射了FITC-CS,研究了CS在小鼠的体内分布。结果显示,miR-4989的靶基因ube2n表达水平显著下调,在体外转染24小时后下调约40%,40小时后下调约60%,而在体内实验中也下调了40%。Western Blot（WB）结果显示,在体外实验中,UBE2N蛋白表达水平分别下调40%和60%,而在体内实验中UBE2N表达下调约30%。小鼠器官荧光情况表明CSNPs大部分聚集于肝脏中,其次分布在肾脏中,而心脏、脾脏、血液中几乎没有。综上所述,我们得出如下结论:CSNPs可以作为一种性能良好的优势载体,能有效地在肝脏靶向传递miRNA,在开发基于miRNA对抗多房棘球蚴感染的治疗方法中具有广阔的应用前景。