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目的:
观察电针、艾灸、刮痧对坐骨神经慢性压迫性损伤模型(CCI模型)大鼠行为学、热痛阈、机械痛阈变化的影响以及对“环跳”“阳陵泉”穴区局部皮肤组织、坐骨神经、背根神经节内相关化学物质的不同变化,揭示不同体表刺激方式的共性以及相对特异性,探究三种不同体表刺激方式治疗坐骨神经痛可能的生物学机制,为不同体表刺激方法的临床准确使用提供一定的客观依据。
方法:
1.观察干预前后大鼠行为学变化
清洁级雄性SD大鼠30只,体质量(200±10)g,随机分为空白组,模型组,电针+模型组(电针组),艾灸+模型组(艾灸组),刮痧+模型组(刮痧组),每组6只(剔除造模失败大鼠),除空白组外均建立CCI模型,分别于造模前、造模后第3天、干预1周后对大鼠左足底进行机械刺激和热辐射刺激,观察统计其干预前后行为学、大鼠机械痛阈及热痛阈的变化,明确干预后大鼠相关行为学数据的恢复情况。
2.CCI模型大鼠电针、艾灸、刮痧干预前后“环跳”“阳陵泉”穴区局部皮肤组织、坐骨神经、背根神经节内相关化学物质的变化
清洁级雄性SD大鼠30只,体质量(200±10)g,参照随机数字表分为空白组,模型组,电针+模型组(电针组),艾灸+模型组(艾灸组),刮痧+模型组(刮痧组)((剔除造模失败大鼠),每组6只,三天后对相应组别行电针、艾灸、刮痧干预,干预部位选择大鼠左后肢“环跳”“阳陵泉”穴,干预一周后,用颈椎脱臼法处死大鼠,即刻进行活体取材,相关组织行WesternBlot检测。
3.CCI模型大鼠电针、艾灸、刮痧干预前后“阳陵泉”穴区局部皮肤组织形态学变化
清洁级雄性SD大鼠30只,体质量(200±10)g,根据随机数字表法分为空白组,模型组,电针+模型组,艾灸+模型组和刮痧+模型组(除空白组外均建立CCI模型,剔除造模失败大鼠),每组6只,三天后对相应组别行电针、艾灸、刮痧干预,经过1周干预后对大鼠进行灌流取材,观察其形态学变化。
结果:
1.干预前后大鼠行为学变化
1.1大鼠一般情况
空白组大鼠皮毛光滑,精力旺盛,好动,反应灵敏,饮食正常;模型组、电针组、艾灸组、刮痧组大鼠建立CCI模型后,大鼠精神状态较差,活动减少,食欲降低,左足(造模一侧)出现跛行、抬足、舔足等痛觉过敏行为。
1.2大鼠热痛阈值和机械痛阈值变化
造模后大鼠出现行为学变化,热痛阈及机械痛阈值下降,提示CCI模型大鼠造模成功。造模后第3天为热痛阈和机械痛阈值降至最低点,故选择造模后第4天进行电针、艾灸、刮痧干预。
造模前,空白组、模型组、电针组、艾灸组和刮痧组大鼠之间热痛阈值和机械痛阈值比较,差异无统计学意义(P>0.05)。干预前,各组大鼠之间热痛阈值和机械痛阈值比较,模型组、电针组、艾灸组、刮痧组与空白组比较,热痛阈和机械痛阈阈值明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。干预1周后,空白组、模型组机械痛阈和热痛阈无明显变化(P>0.05),电针组、艾灸组、刮痧组机械痛阈和热痛阈均显著上升,与模型组比较均具有统计学意义(P<0.05)。
2.CCI模型大鼠电针、艾灸、刮痧干预前后“环跳”“阳陵泉”穴区局部皮肤组织、坐骨神经、神经节等相关化学物质的变化
2.1电针、艾灸、刮痧均能降低CCI模型大鼠坐骨神经、背根神经节、阳陵泉及环跳穴区中CGRP的相对表达量,模型组与空白组比较具有统计学意义(P<0.05),各干预组与模型组比较具有统计学意义(P<0.05);其中艾灸干预组含量较高,其次为电针干预组,刮痧干预组较少。
2.2电针、艾灸、刮痧均能提高CCI模型大鼠坐骨神经、背根神经节、阳陵泉及环跳穴区中NGF的相对表达量,模型组与空白组比较具有统计学意义(P<0.05),各干预组与模型组比较具有统计学意义(P<0.05),其中刮痧干预组的NGF相对表达量提高较为显著,其次为电针组和艾灸组。
2.3电针、艾灸、刮痧均能降低CCI模型大鼠坐骨神经、背根神经节、阳陵泉及环跳穴区中TNF-α的相对表达量,模型组与空白组比较具有统计学意义(P<0.05),各干预组与模型组比较具有统计学意义(P<0.05);其中电针干预组更为接近正常,其次为艾灸干预组和刮痧干预组。
3.CCI模型大鼠电针、艾灸、刮痧干预前后“阳陵泉”穴区局部皮肤组织形态学变化
正常组、模型组、电针组、艾灸组、刮痧组“阳陵泉”穴区局部皮肤组织的表皮层、真皮层及皮下组织均有5-HT阳性标记,在表皮下与真皮浅层形成与表皮平行的不连续细胞带,在真皮层主要分布在毛囊、腺体、血管周围,在皮下组织主要聚集在血管旁。与空白组相比较,模型组5-HT阳性标记明显升高(P<0.05);与模型组相比较,电针组、艾灸组、刮痧组5-HT的阳性标记明显减少(P<0.05),5-HT的阳性标记均明显多于空白组(P<0.05)。
结论:
1.电针、艾灸、刮痧干预可以减轻CCI模型所引起的大鼠热痛觉和机械性痛觉过敏,不同体表刺激对热痛阈和机械痛阈值的恢复情况有所不同,电针干预恢复最好,其次为艾灸干预和刮痧干预。
2.5-HT、NGF、CGRP、TNF-α这几种化学物质可能参与电针、艾灸、刮痧缓解坐骨神经痛的神经免疫通路。干预1周后,NGF表现为刮痧干预效果优于电针干预和艾灸干预,其他则表现为电针干预效果优于艾灸干预和刮痧干预。
3.不同穴区皮肤组织中所含化学物质具有差异,与环跳穴相比阳陵泉穴的生物活性物质更多,更容易被体表刺激激活。
观察电针、艾灸、刮痧对坐骨神经慢性压迫性损伤模型(CCI模型)大鼠行为学、热痛阈、机械痛阈变化的影响以及对“环跳”“阳陵泉”穴区局部皮肤组织、坐骨神经、背根神经节内相关化学物质的不同变化,揭示不同体表刺激方式的共性以及相对特异性,探究三种不同体表刺激方式治疗坐骨神经痛可能的生物学机制,为不同体表刺激方法的临床准确使用提供一定的客观依据。
方法:
1.观察干预前后大鼠行为学变化
清洁级雄性SD大鼠30只,体质量(200±10)g,随机分为空白组,模型组,电针+模型组(电针组),艾灸+模型组(艾灸组),刮痧+模型组(刮痧组),每组6只(剔除造模失败大鼠),除空白组外均建立CCI模型,分别于造模前、造模后第3天、干预1周后对大鼠左足底进行机械刺激和热辐射刺激,观察统计其干预前后行为学、大鼠机械痛阈及热痛阈的变化,明确干预后大鼠相关行为学数据的恢复情况。
2.CCI模型大鼠电针、艾灸、刮痧干预前后“环跳”“阳陵泉”穴区局部皮肤组织、坐骨神经、背根神经节内相关化学物质的变化
清洁级雄性SD大鼠30只,体质量(200±10)g,参照随机数字表分为空白组,模型组,电针+模型组(电针组),艾灸+模型组(艾灸组),刮痧+模型组(刮痧组)((剔除造模失败大鼠),每组6只,三天后对相应组别行电针、艾灸、刮痧干预,干预部位选择大鼠左后肢“环跳”“阳陵泉”穴,干预一周后,用颈椎脱臼法处死大鼠,即刻进行活体取材,相关组织行WesternBlot检测。
3.CCI模型大鼠电针、艾灸、刮痧干预前后“阳陵泉”穴区局部皮肤组织形态学变化
清洁级雄性SD大鼠30只,体质量(200±10)g,根据随机数字表法分为空白组,模型组,电针+模型组,艾灸+模型组和刮痧+模型组(除空白组外均建立CCI模型,剔除造模失败大鼠),每组6只,三天后对相应组别行电针、艾灸、刮痧干预,经过1周干预后对大鼠进行灌流取材,观察其形态学变化。
结果:
1.干预前后大鼠行为学变化
1.1大鼠一般情况
空白组大鼠皮毛光滑,精力旺盛,好动,反应灵敏,饮食正常;模型组、电针组、艾灸组、刮痧组大鼠建立CCI模型后,大鼠精神状态较差,活动减少,食欲降低,左足(造模一侧)出现跛行、抬足、舔足等痛觉过敏行为。
1.2大鼠热痛阈值和机械痛阈值变化
造模后大鼠出现行为学变化,热痛阈及机械痛阈值下降,提示CCI模型大鼠造模成功。造模后第3天为热痛阈和机械痛阈值降至最低点,故选择造模后第4天进行电针、艾灸、刮痧干预。
造模前,空白组、模型组、电针组、艾灸组和刮痧组大鼠之间热痛阈值和机械痛阈值比较,差异无统计学意义(P>0.05)。干预前,各组大鼠之间热痛阈值和机械痛阈值比较,模型组、电针组、艾灸组、刮痧组与空白组比较,热痛阈和机械痛阈阈值明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。干预1周后,空白组、模型组机械痛阈和热痛阈无明显变化(P>0.05),电针组、艾灸组、刮痧组机械痛阈和热痛阈均显著上升,与模型组比较均具有统计学意义(P<0.05)。
2.CCI模型大鼠电针、艾灸、刮痧干预前后“环跳”“阳陵泉”穴区局部皮肤组织、坐骨神经、神经节等相关化学物质的变化
2.1电针、艾灸、刮痧均能降低CCI模型大鼠坐骨神经、背根神经节、阳陵泉及环跳穴区中CGRP的相对表达量,模型组与空白组比较具有统计学意义(P<0.05),各干预组与模型组比较具有统计学意义(P<0.05);其中艾灸干预组含量较高,其次为电针干预组,刮痧干预组较少。
2.2电针、艾灸、刮痧均能提高CCI模型大鼠坐骨神经、背根神经节、阳陵泉及环跳穴区中NGF的相对表达量,模型组与空白组比较具有统计学意义(P<0.05),各干预组与模型组比较具有统计学意义(P<0.05),其中刮痧干预组的NGF相对表达量提高较为显著,其次为电针组和艾灸组。
2.3电针、艾灸、刮痧均能降低CCI模型大鼠坐骨神经、背根神经节、阳陵泉及环跳穴区中TNF-α的相对表达量,模型组与空白组比较具有统计学意义(P<0.05),各干预组与模型组比较具有统计学意义(P<0.05);其中电针干预组更为接近正常,其次为艾灸干预组和刮痧干预组。
3.CCI模型大鼠电针、艾灸、刮痧干预前后“阳陵泉”穴区局部皮肤组织形态学变化
正常组、模型组、电针组、艾灸组、刮痧组“阳陵泉”穴区局部皮肤组织的表皮层、真皮层及皮下组织均有5-HT阳性标记,在表皮下与真皮浅层形成与表皮平行的不连续细胞带,在真皮层主要分布在毛囊、腺体、血管周围,在皮下组织主要聚集在血管旁。与空白组相比较,模型组5-HT阳性标记明显升高(P<0.05);与模型组相比较,电针组、艾灸组、刮痧组5-HT的阳性标记明显减少(P<0.05),5-HT的阳性标记均明显多于空白组(P<0.05)。
结论:
1.电针、艾灸、刮痧干预可以减轻CCI模型所引起的大鼠热痛觉和机械性痛觉过敏,不同体表刺激对热痛阈和机械痛阈值的恢复情况有所不同,电针干预恢复最好,其次为艾灸干预和刮痧干预。
2.5-HT、NGF、CGRP、TNF-α这几种化学物质可能参与电针、艾灸、刮痧缓解坐骨神经痛的神经免疫通路。干预1周后,NGF表现为刮痧干预效果优于电针干预和艾灸干预,其他则表现为电针干预效果优于艾灸干预和刮痧干预。
3.不同穴区皮肤组织中所含化学物质具有差异,与环跳穴相比阳陵泉穴的生物活性物质更多,更容易被体表刺激激活。