二花脸猪生长期肌肉内脂肪组织学和分子生物学特征的研究

来源 :南京农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lichangsong3
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为了提高猪肌内脂水平、改良肉质,本文用组织学和分子生物学方法探讨了二花脸猪肌内脂肪发育的规律和特点,并用大约克猪作为对照.用索氏抽提法测定肌内脂,比较了不同体重和不同日龄肌内脂肪发育变化;采用组织切片技术,观察了不同体重阶段二花脸猪肌内脂肪细胞发育情况;以18S为内标对脂肪代谢基因的表达进行了相对定量分析,还用RT-PCR-SSCP法对候选基因PPAR和ME基因进行基因分型,并对基因型与肌内脂的相关性进行了分析.研究结果如下:1.二花脸猪生长及肌内脂肪发育的规律选择二花脸和大约克纯种公猪为实验材料,用索氏抽提法分析肌内脂含量.结果发现:(1)二花脸猪与大约克猪体重差异极显著(P<0.01),大约克猪达90kg体重日龄为180天,而二花脸猪为300天.(2)不同日龄二花脸猪肌内脂差异极显著(P<0.01).(3)发现大约克猪3日龄肌内脂含量有明显上升的现象.2.二花脸猪肌内脂肪细胞发育的特点选择20,40,60和90kg纯种二花脸公猪为实验材料,每个体重阶段屠宰4头,取冈上肌和半膜肌作冰冻切片,分别用桔黄G-苯胺蓝和苏木素-伊红染色,测定脂肪细胞直径.3.二花脸猪脂肪代谢基因发育的规律选择纯种二花脸和大约克公猪各16头,分别于20,40,60和90kg时屠宰,每个体重阶段每个品种屠宰4头,取冈上肌和半膜肌,提取总RNA.提示:PPAR基因持续较高水平表达是二花脸猪肌内脂不断沉积的重要原因,也能部分解释生长后期(40 kg后)大约克猪肌内脂低于二花脸猪的现象.4.PPAR基因和ME基因基因分型及基因型对肌内脂的影响用索氏抽提法筛选出肌内脂含量较高和较低的二花脸猪和大约克猪为实验材料,通过RT-PCR-SSCP法对ME基因进行分型.结果发现:(1)不同PPAR基因型问肌内脂和其脂肪性状没有发现显著差异(P>0.05),不同ME基因型间肌内脂肪含量也没有发现显著差异(P>0.05).(2)长×大×二猪群中发现两种PPAR基因型:AA和AB;长×长×梅猪群中发现三种基因型:AA,AB和BB.(3)对ME基因的RT-PCR-SSCP分型分析发现了一个新等位基因.
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