【摘 要】
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目的:随着不孕不育率的攀升和辅助生殖技术的广泛应用,越来越多的研究开始关注辅助生殖技术的安全性及其可能对子代造成的影响。然而辅助生殖技术对脐静脉张力调控的影响尚不
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目的:随着不孕不育率的攀升和辅助生殖技术的广泛应用,越来越多的研究开始关注辅助生殖技术的安全性及其可能对子代造成的影响。然而辅助生殖技术对脐静脉张力调控的影响尚不明确。本课题旨在探究体外受精-胚胎移植(In vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)技术对组胺介导的脐静脉张力的影响及可能机制。方法:于2017-2020年期间,在苏州大学附属第一医院和苏州市立医院收集剖宫产分娩的31例足月、单胎体外受精-胚胎移植的脐带血管和脐静脉血,其中包括12例体外受精-鲜胚移植的样本以及19例体外受精-冻胚移植的样本。对照组为同期在以上医院收集的剖宫产的20例自然妊娠的足月、单胎的样本。样本来源的孕产妇同时满足以下基本要求:初产妇;孕龄27-35岁;无内外科合并症或妊娠并发症(如妊娠高血压、妊娠糖尿病等)。分离脐静脉,运用JZ100张力换能器和Medlab6.0检测脐静脉在组胺介导下的血管张力变化以及孵育苯海拉明、法莫替丁探究组胺受体(Histamine receptor,HR)在张力调控中所发挥的作用。分别孵育伊比利亚蝎毒素、4-氨基吡啶、尼非地平、钙调蛋白激酶 Ⅱ(Calmodulin-dependent protein kinase Ⅱ,CaMK Ⅱ)抑制剂KN93,检测离子通道及CaMK Ⅱ在组胺介导收缩中的作用。Real-time PCR、Western blot技术检测三组脐静脉中H1R、H2R及L-型电压依赖型钙通道(L-type voltage-dependent calcium channel,L-Ca2+)的 mRNA 和蛋白表达。酶联免疫吸附实验检测三组脐静脉血中组胺浓度。结果:无论在正常组、鲜胚移植组还是冻胚移植组,组胺在脐静脉上均介导收缩反应。在冻胚移植组,组胺在10-5 mol/L浓度介导的收缩较正常组和鲜胚移植组明显增强。鲜胚移植组与正常组相比,组胺介导的脐静脉收缩无明显差异。三组脐静脉中,苯海拉明可明显阻断组胺介导的血管收缩,而法莫替丁在组胺介导的收缩中无明显作用;H1R、H2R的分子表达在三组脐静脉中无统计学差异。伊比利亚蝎毒素、4-氨基吡啶未明显改变组胺介导的收缩,提示大电导钙激活钾通道(Large-conductance,calcium-activated potassium channel,BKCa)和电压依赖型钾通道(Voltage-dependent potassium channel,Kv)在组胺介导的脐静脉收缩中无明显作用。尼非地平明显抑制组胺介导的脐静脉收缩,且在冻胚移植组尼非地平介导的收缩抑制效应较其他两组更早出现。孵育KN93明显降低组胺介导的脐静脉收缩,且在组胺10-5 mol/L浓度下,冻胚移植组KN93介导的收缩抑制效应较其他两组更明显。L-Ca2+的mRNA和蛋白表达水平在三组中未见统计学差异。三组间脐静脉血中的组胺浓度无统计学差异。结论:组胺介导的脐静脉收缩主要通过H1R,而H2R无明显作用。BKCa和Kv在组胺介导的脐静脉张力调控中无明显作用。与正常组和鲜胚移植组相比,冻胚移植组的脐静脉对组胺的收缩反应更敏感,这与冻胚移植组脐静脉中L-Ca2+通道和CaMKⅡ的敏感性增强有关。
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