论文部分内容阅读
目的:观察高血脂对脑缺血再灌注后大鼠海马GFAP和bFGF表达的影响,为探讨脑缺血再灌注损伤的机制提供依据。方法:正常成年健康Sprague-Dawley大鼠166只,体重160-180g,由山西医科大学实验动物中心提供。随机分为脑缺血再灌注组(52只)、高血脂合并脑缺血再灌注组(52只)和假手术组(62只)三大组。两组缺血再灌注组均又分为缺血2h再灌注1d(I2h/R1d)、3d(I2h/R3d)、7d(I2h/R7d)、14d(I2h/R14)4组,每组13只.,分别用于免疫组化、HE染色6只和蛋白印迹6只、每组1只用于TTC染色检测;假手术组用于免疫组化和HE染色的48只(高脂假手术组24只,正常假手术组24只),用于蛋白印迹的12只,2只用于TTC染色检测。高脂饮食组模型采用高脂饲料自由采食制作。六周后,用化学自动分析仪分析其总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白(HDL-L)、低密度脂蛋白(LDL-L),各项与高脂饮食前比较有统计学意义,即模型制备成功。在此基础上,进行脑缺血再灌注模型。缺血再灌注组采用大脑中动脉缺血模型制作。用神经行为学和TTC染色,检验缺血再灌注组模型是否成功。结果:1.GFAP和bFGF的表达:GFAP和bFGF免疫阳性细胞在海马CA4区多见。假手术组免疫阳性细胞较弱;脑缺血再灌注组I2h/1d增高,I2h/3d达高峰,I2h/7d下降,I2h/14d表达明显下降;GFAP高血脂合并脑缺血再灌注组表达高峰点推迟,I2h/7d达最高,bFGF高血脂合并脑缺血再灌注组与脑缺血再灌注组表达一致。Westernblot结果与上述结果一致。2.在相同时间点,GFAP和bFGF高血脂合并脑缺血再灌注组与脑缺血再灌注组相比阳性表达量明显降低。3.GFAP与bFGF表达趋势相似,关联性分析显示正相关,系数为0.5。结论:1.脑缺血再灌注后,GFAP与bFGF免疫阳性星形胶质细胞细胞在海马CA4区多见。说明GFAP、bFGF可能参与海马区脑缺血再灌注损伤修复作用。2.GFAP与bFGF在两组脑缺血再灌注组的表达呈动态变化,而且GFAP与bFGF的表达在时间上具有一致性,关联分析呈正相关,提示:bFGF对GFAP的表达有上调作用。3.在同一时间点,.GFAP与bFGF高血脂合并脑缺血再灌注组与脑缺血再灌注组相比阳性表达量明显降低;高血脂合并脑缺血再灌注组神经行为学得分明显高于脑缺血再灌注组,均提示高血脂加重脑缺血再灌注损伤。