背景:肺癌是全球癌症相关性死亡的首要原因。据2019年统计,肺癌新诊断病例占所有新诊断癌症总数的13%,而肺癌在男性和女性中的死亡病例数分别占所有癌症死亡的24%和23%。肺癌预后较差,超过一半的被诊断患有肺癌的人在诊断后的一年内死亡,并且5年生存率不到18%。根据组织学,肺癌的两种主要类型小细胞肺癌和非小细胞肺癌(NSCLC)分别占所有肺癌的15%和85%。NSCLC目前的治疗方法还是早期手术,某些局部晚期癌症辅以放化疗,转移性肿瘤进行姑息化疗,治疗手段局限,因而寻找肺癌治疗的新靶点尤为重要。肿瘤的发生与细胞的异常增殖以及异常凋亡有关。正常情况下,细胞的增殖(Proliferation)和凋亡(Apoptosis)两者相互协调,维持动态平衡。有证据表明,细胞凋亡的缺陷可导致癌症或自身免疫。也有报道称癌症是细胞周期调控的正常机制功能失调,细胞过度增殖或细胞去除率降低的一个例子。有人认为在癌变过程中抑制细胞凋亡可以在某些癌症的治疗中起重要作用,肿瘤细胞可利用多种分子机制来调控细胞增殖与凋亡。多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶-6(GALNT6)是一种糖基转移酶,它参与粘蛋白型O-糖基化(O-Gal NAc糖基化)修饰的起始步骤,催化Gal NAc结合到蛋白质丝氨酸或苏氨酸的侧链羟基上,形成O-糖基化。有证据表明,GALNT6在多种肿瘤临床样本组织中呈异常表达,从而引起肿瘤细胞的增殖、凋亡及转移等功能的改变,因此,GALNT6可以作为肿瘤发生、发展和预后的潜在标志物。许多研究表明,GALNT6在多种肿瘤中通过促进底物异常糖基化,从而影响了肿瘤的发生与发展。然而在已有的研究中,关于GALNT6在肺腺癌中对增殖及凋亡的作用以及GALNT6的O-糖基化底物尚不清楚,因此目前仍不清楚GALNT6是如何影响肿瘤的发生与发展。目前,关于GALNT6在肺癌细胞中对增殖及凋亡的作用以及分子机制尚不清楚,本研究通过降低肺腺癌细胞中GALNT6的表达量探究了GALNT6对细胞增殖、凋亡的影响以及作用机制,以期为肺癌的诊断和治疗提供新的思路。研究方法:本实验首先利用Western Blot技术检测GALNT6在肺腺癌细胞系中的表达情况;然后,通过Western Blot、CCK-8实验、克隆形成实验、细胞凋亡实验和动物皮下成瘤实验等,本实验研究了GALNT6的表达对肺腺癌细胞增殖和凋亡的影响;最后,本实验通过免疫共沉淀实验、免疫荧光等揭示其潜在的分子机制,为GALNT6作为肺癌诊治的新靶点提供了证据支持。结果:本实验首先发现GALNT6在肺腺癌细胞系中高表达。之后,本实验对肺腺癌细胞中的GALNT6进行敲低,当GALNT6被敲低时,肿瘤细胞的增殖能力和抗凋亡能力均减弱。最后,本实验揭示了肺腺癌细胞影响细胞增殖、凋亡的分子机制,实验证明GALNT6通过O-糖基化增强了底物EBP蛋白的稳定性,从而影响了肿瘤的增殖和凋亡。结论:本研究揭示了肺腺癌细胞影响细胞增殖及凋亡的分子机制,GALNT6通过O-糖基化增强了底物蛋白EBP的稳定性,从而影响肺腺癌的增殖和凋亡,故GALNT6可作为一种有前景的肺癌诊治的新靶点。