热休克反应天然诱导物的筛选及其在防治化疗脱发中的初探

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目的:筛选出具有诱导热休克反应的天然中药提取物,并对其机理进行初步的研究;利用热休克反应的原理针对化疗脱发开发出一种预防和治疗化疗脱发的新药物及防治化疗脱发的新方法。 方法:⑴通过MTT法、双荧光素酶报告系统、免疫荧光和Western blot法筛选具有诱导热休克反应的中药提取物。⑵初步研究筛选出的中药提取物诱导热休克反应的机理。⑶利用依托泊苷构建SD大鼠化疗脱发模型。⑷利用热激方法和热休克反应诱导剂格尔德霉素对化疗脱发模型动物进行预防和治疗化疗脱发的实验。⑸在前者成功的基础上进行方法的改进,并尝试使用筛选出的中药提取物进行预防和治疗化疗脱发。 结果:①通过MTT法、双荧光素酶报告系统、免疫荧光和Western blot法筛选出并验证了天然药物成分穿心莲内酯具有诱导热休克反应的作用。②通过Western blot,免疫荧光和siRNA干扰等方法证明了穿心莲内酯是通过激活HSF1来起到诱导热休克反应的作用。③成功构建SD大鼠的化疗脱发模型。④能够诱导热休克反应的格尔德霉素和热激处理后,在SD大鼠化疗脱发模型上成功预防和治疗了化疗脱发,证明利用热休克反应防治化疗脱发的可行性。⑤穿心莲内酯在体外实验证实能激发皮肤细胞的热休克蛋白表达,但体内实验结果无明显预防和治疗化疗脱发的作用,改进方法结果不理想。 结论:⑴爵床科植物穿心莲中的提取物穿心莲内酯能够通过激活HSF1来诱导热休克蛋白表达,使机体产生热休克反应,从而起到各种保护和防御的生物学功能。⑵在SD大鼠动物模型上通过皮内注射格尔德霉素和皮肤表面恒温加热的方法可以有效预防和治疗依托泊苷诱导的化疗脱发,从而证实热休克反应防治化疗脱发的可行性。⑶在我们的实验中,并没有观察到热休克反应天然诱导物穿心莲内酯有明显的预防和治疗化疗脱发的作用。
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