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共轭亚油酸（Conjugated linoleic acid，CLA）是指一组具有位置和几何异构的十八碳共轭二烯酸的总称。它广泛存在于自然界中，在反刍动物的肉制品和乳制品中含量较多。动物和人体试验已经证实CLA具有诸多生理功能，主要包括抗癌、抗动脉粥样硬化、降低胆固醇、降低体脂、减少脂肪沉积、调节骨组织代谢、强化机体免疫和抗糖尿病。基于CLA的生理功能，营养学家们努力提高乳中CLA含量，但研究发现，提高乳中CLA含量的同时，却导致奶牛乳脂降低综合症（MFD）。目前研究证实t10, c12-CLA可能是导致奶牛乳脂降低综合症（MFD）的主要原因，因此本试验采用组织块法体外培养奶牛乳腺上皮细胞，探索c9, t11-CLA和t10, c12-CLA纯品对乳腺细胞内乳脂合成及相关基因mRNA转录的影响。在分子水平上，探讨CLA对奶牛乳腺上皮细胞甘油三酯（TAG）含量及脂肪酸合成相关基因mRNA转录的影响。试验结果表明：（1）采用组织块法实现了体外培养出奶牛乳腺上皮细胞，细胞成活率较高，达到85%以上；经过多次传代和角蛋白18鉴定后，可得到纯化的奶牛乳腺上皮细胞。测定乳腺上皮细胞的相关生物学性状，试验结果为细胞生长曲线呈“S”型，符合一般细胞生长规律；细胞群体倍增时间为32.18h；细胞接种存活率最高可达87%。（2）试验结果表明，c9, t11CLA和t10, c12CLA均可显著降低乳腺上皮细胞内TAG含量（P＜0.05），且t10, c12CLA对TAG的抑制率高于c9, t11CLA。（3）气相色谱检测CLA对细胞中脂肪酸组成的影响，结果表明150μmol/L c9, t11CLA可显著提高细胞内单不饱和脂肪酸（MUFA）的比例（P＜0.05），而50μmol/L c9, t11-CLA显著增加细胞内饱和脂肪酸（SFA）的比例（P＜0.05）；细胞内MUFA的比例随着t10, c12CLA浓度的增加，呈显著下降趋势（P＜0.05）；两种CLA对多不饱和脂肪酸（PUFA）的比例都没有显著影响（P＞0.05）。（4）外源添加不同浓度的c9, t11-CLA与t10, c12-CLA直接作用于乳腺上皮细胞48h，采用实时荧光定量PCR技术，测定乳腺上皮细胞脂肪酸摄取与转运及甘油三酯合成相关基因mRNA的转录。试验结果：与对照组相比，50～150μmol/L的c9, t11CLA和t10, c12CLA均显著下调LPL基因mRNA的转录水平（P＜0.05）；50μmol/L c9, t11CLA显著下调CD36基因mRNA的转录水平（P＜0.05），150μmol/L c9, t11CLA上调它的转录水平（P＜0.05）, CD36mRNA的转录水平随t10, c12CLA浓度增加呈显著上升趋势（P＜0.05）；150μmol/L c9, t11CLA和不同浓度的t10, c12CLA均可显著上调ACBP基因mRNA的转录水平（P＜0.05）；相比对照组，c9, t11CLA与t10, c12CLA均显著下调FABP3基因mRNA的转录水平（P＜0.05）；150μmol/L的c9, t11CLA和t10, c12CLA均可显著上调AGPAT基因mRNA的转录水平（P＜0.05）。本试验采用组织块法实现了体外培养出奶牛乳腺上皮细胞，细胞接种存活率较高。试验证实CLA抑制乳腺TAG合成且影响乳腺细胞的脂肪酸合成；证明两种CLA均显著降低LPLmRNA和FABP3mRNA的转录水平，t10, c12CLA比c9, t11CLA的降低效果明显。