研究背景:脑血管疾病已成为人类死亡的重要原因。缺氧可导致成年人的大脑中动脉功能障碍,增加脑血管疾病的发病风险。宫内缺氧是孕期及分娩期常见的并发症。宫内缺氧可导致胎儿宫内发育迟缓,神经系统异常发育,甚至胎死宫内。关于宫内缺氧对胎儿大脑中动脉收缩功能的影响目前已有报道,而宫内缺氧对胎儿大脑中动脉舒张功能的影响目前尚不明确。研究方法:随机选取妊娠晚期母羊（孕122±3天,足月约145天）,麻醉成功后,在无菌条件下,胎羊安装脐带环,同时行双侧股动脉插管术。术后恢复4-5天,通过向脐带环内注射生理盐水压迫脐带,限制脐血流,使胎羊血氧分压降至基础值的50%左右。压迫持续50分钟后,抽出生理盐水,恢复脐血流。实验中将宫内缺氧的胎羊定义为宫内缺氧组（Hypoxia）,未施行宫内缺氧的胎羊定义为对照组（Control）。宫内缺氧组胎羊间断缺氧5天后,同时取宫内缺氧组和对照组的胎羊大脑中动脉,应用微血管功能实验、超氧阴离子荧光探针（DHE）、透射电子显微镜（TEM）、酶联免疫吸附测定实验（ELISA）、荧光定量聚合酶链式反应实验（RT-PCR）、蛋白质免疫印迹实验（western-blot）、细胞实验等技术,探讨宫内缺氧对乙酰胆碱（ACh）介导的胎羊大脑中动脉舒张功能的影响及机制。结果:（1）硝普钠（SNP）可介导胎羊大脑中动脉舒张反应,宫内缺氧后SNP介导的胎羊大脑中动脉舒张反应在对照组和宫内缺氧组无显著差异。（2）ACh可介导胎羊大脑中动脉舒张反应,且宫内缺氧后,ACh介导的胎羊大脑中动脉舒张反应较对照组显著减弱。（3）在对照组和宫内缺氧组,阿托品（非选择性毒蕈碱受体（CHRM）阻断剂）、P-F-HHSiD（CHRM3阻断剂）、L-NAME（内皮型一氧化氮合酶（NOS3）抑制剂）、u0126（细胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）阻断剂）几乎完全阻断了 ACh介导的胎羊大脑中动脉舒张反应,AF-DX 116（CHRM2阻断剂）和托吡卡胺（CHRM4阻断剂）部分阻断了 ACh介导的胎羊大脑中动脉舒张反应,而吲哚美辛（环氧酶（COX）抑制剂）和SB203580（丝裂原活化蛋白激酶14（MAPK14）阻断剂）未明显阻断ACh介导的胎羊大脑中动脉舒张反应。在宫内缺氧组,tempol（超氧物歧化酶（SOD）类似物）和PS-341（ERK1/2激动剂）可以逆转ACh介导的胎羊大脑中动脉舒张功能减弱。（4）宫内缺氧组胎羊大脑中动脉CHRM2、CHRM3的mRNA表达水平,以及CHRM3、p-NOS3、SOD2、MAPK14、p-MAPK14、ERK1/2、p-ERK1/2 的蛋白表达水平较对照组显著下降。（5）ELISA结果提示宫内缺氧后,胎羊血液循环中Total SOD、Mn-SOD、过氧化氢酶（CAT）较宫内缺氧前显著下降,而活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）较宫内缺氧前显著升高。胎羊大脑中动脉一氧化氮（NO）生成较对照组显著下降。（6）DHE结果提示宫内缺氧组胎羊大脑中动脉的ROS生成较对照组显著增高。（7）TEM结果提示宫内缺氧后,胎羊大脑中动脉内皮细胞部分脫落,线粒体超微结构损伤。（8）在人脐静脉内皮细胞,缺氧增加了人脐静脉内皮细胞ROS的产生,降低了CHRM3 的 mRNA,以及 CHRM3、p-NOS3、SOD1、SOD2、SOD3、p-MAPK14、ERK1/2、p-ERK1/2的蛋白表达水平。（9）在人脐静脉内皮细胞孵育tempol,可部分逆转缺氧导致的人脐静脉内皮细胞ROS过度生成,增加p-NOS3的蛋白表达水平。（10）在人脐静脉内皮细胞孵育PS-341增加p-ERK1/2和p-NOS3的蛋白表达水平。结论:宫内缺氧减弱了 ACh介导的胎羊大脑中动脉舒张反应,其机制主要是通过降低胎羊大脑中动脉的CHRM3和p-NOS3的蛋白表达水平,而胎羊大脑中动脉p-NOS3的表达水平降低与ROS的过度生成及ERK1/2的功能下降有关。