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纳他霉素(Natamycin)为多烯烃大环内酯类抗真菌抗生素。纳他霉素主要由恰塔努加链霉菌(Streptomyces chattanovgensis),纳塔尔链霉菌(Streptomyces natalensis)和褐黄孢链霉菌(Streptomyces gilvosporeus)发酵生产而来。由于它能够专性的抑制酵母菌和霉菌,是一种高效、广谱的抗真菌抗生素,且对哺乳动物细胞的毒性极低,因此被广泛应用于食品防腐和真菌引起的疾病的治疗。目前国内纳他霉素发酵的水平较低,导致成本高、应用前景受到限制。因此,对纳他霉素发酵进行深入的研究和开发具有重要意义。本文围绕如何提高褐黄孢链霉菌WZ-18的纳他霉素的产量进行了研究,获得结果如下:首先建立了高效液相色谱法和紫外分光光度法来检测发酵液中的纳他霉素含量。采用HPLC法,将样品用甲醇萃取后,进行检测,检测条件为:色谱柱为DikmaTechnologies C18(5um,250mm×4.6mm),流动相为甲醇—水—甲酸(50:50:0.05,体积比),流速为1.00mL/min,柱温35℃,紫外检测波长为303nm;采用紫外分光光度法,将样品用甲醇提取过滤后,稀释到适当浓度,在303nm处测定吸光值。前者定量准确,精确度高,但耗时较长;后者简单快速,但有时会受到一些情况的干扰,不能精确定量。故在试验中,将两种检测方法结合使用,达到既准确又快速的检测发酵液中纳他霉素含量的目的。通过对几种斜面培养基和种子培养基的比较,确定了斜面培养基成分为葡萄糖10g/L,蛋白胨5g/L,酵母粉3g/L,麦芽浸粉3g/L,pH7.0～7.1;种子培养基成分为葡萄糖30g/L,酵母粉6g/L,大豆蛋白胨16g/L,pH7.0;种子的培养时间为44～48h;发酵接种量为6%。对发酵培养基进行优化,确定葡萄糖为适宜碳源,大豆蛋白胨和酵母粉的混和氮源为适宜氮源,运用正交试验确定发酵培养基成分为葡萄糖40g/L,大豆蛋白胨20g/L,酵母粉7g/L,初始pH8.0。在培养基优化的基础上,对发酵工艺参数进行优化,考察了发酵温度、溶氧对发酵的影响,并研究了添加铵离子捕捉剂磷酸镁和前体物质对纳他霉素产量的影响,最终确定发酵温度为29℃,装液量为300mL三角瓶装液40mL,磷酸镁的添加量为0.2%,在发酵48h时添加0.2%的丙酸钠。在此工艺下,纳他霉素产量达到3.22g/L,与优化前的产量1.71g/L相比提高了88.3%。进行了10L自动发酵罐的分批发酵试验和分批补料发酵试验。在不补料的情况下,纳他霉素产量为2.91g/L;通过流加葡萄糖的方式进行补料,使菌体老化减缓,纳他霉素的生产期延长,纳他霉素产量提高,最终纳他霉素的产量为3.43g/L,与分批发酵相比提高了17.9%。