葛根素对人非小细胞肺癌细胞侵袭和迁移的影响及相关分子机制研究

来源 :辽宁中医药大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:rtreterter
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目的:本研究通过将中国传统中药材葛根的有效成分--葛根素,作用于人非小细胞肺癌NCI-H1299细胞,观察其对NCI-H1299细胞侵袭和迁移的影响并探索相关分子机制。材料与方法:1.通过CCK-8法测定不同剂量葛根素在经过24、48及72h后对NCI-H1299细胞体外增殖活力的作用,筛选出葛根素对细胞的增殖活力没有产生明显抑制作用的处理时间和药物剂量作为后续实验干预条件,然后采用伤口愈合实验和Transwell法分别检测葛根素对人非小细胞肺癌NCI-H1299细胞迁移能力的影响和对细胞侵袭能力的影响;2.通过Western blot实验检测葛根素对NCI-H1299细胞中E-cadherin和Vimentin蛋白的表达。结果:1.根据CCK-8法检测结果显示,葛根素对NCI-H1299细胞增殖活力呈现出一定的抑制作用,具体可表现为剂量与时间的依赖性。葛根素对NCI-H1299细胞没有产生明显抑制作用的剂量和时间条件分别是剂量为10、20、40μmol/L的葛根素,药物作用24h;细胞伤口愈合实验的结果显示:与阴性对照组比较,10、20、40μmol/L葛根素药物组的伤口愈合面积明显缩小NCI-H1299细胞的迁移率随葛根素剂量的上升而明显下降,以40μmol/L葛根素处理组最为明显(p<0.05);Transwell侵袭实验结果显示:与阴性对照组比较,NCI-H1299细胞的侵袭率被葛根素呈浓度依赖性的抑制,在40μmol/L时抑制作用最显著,在统计学差异方面有意义(p<0.05)。2.经Western blot实验检测结果显示:与阴性对照组比较,10、20、40μmol/L葛根素组处理后,随葛根素剂量的升高,细胞中E-cadherin蛋白表达呈现显著上调趋势,而Vimentin蛋白表达呈显著下调趋势(p<0.05),有统计学差异。结论:1.葛根素可以抑制人非小细肺癌NCI-H1299细胞的增殖活力,并在对细胞增殖活力无明显抑制作用的药物剂量和处理时间情况下仍能够有效地抑制细胞的迁移和侵袭。2.葛根素抑制人非小细胞肺癌NCI-H1299细胞侵袭和迁移能力的可能机制与其提高细胞中E-cadherin表达,降低Vimentin表达,进而逆转NCI-H1299细胞上皮-间质转型的发生(epithelial-mesenchymal transition,EMT)有关。
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