慢性粒细胞白血病(Chronic myeloid leukemia，CML)是一种骨髓多能造血干细胞异常增生的血液系统恶性肿瘤，占成人白血病的20％，目前尚无有效的治疗方法。在CML的发病机理中，c-abl从第9号染色体转位到第22号染色体断裂点集簇区(break point cluster)，形成bcr-abl融合基因，其编码的p210蛋白具有异常的蛋白酪氨酸激酶活性，在慢粒的发病中起重要的作用。由于慢粒具有上述特异性的遗传学标志， bcr-abl融合基因成为慢粒治疗的特异性靶点。 自体骨髓移植是有望治愈慢粒的方法之一，但因缺乏有效的体外骨髓净化措施而限制了其在临床上的广泛应用。通过核酶特异性切割融合基因mRNA以阻断蛋白表达是慢粒基因治疗的可行策略之一。通过这种方法有望达到骨髓净化、治愈慢粒的目的。 因此，为了观察bcr-abl特异性三核酶对CML细胞生物学特性的影响，进一步探讨其作用机理及临床应用的可能性，我们进行了如下的实验： 1 bcr-abl系列核酶载体的构建及鉴定根据bcr-abl融合基因cDNA序列，分别针对融合位点上游-29bp，-1bp及下游+15bp设计3个锤头状核酶RZ1、RZ2及RZ3，并通过基因重组的方法将其顺序定向克隆入改建的pDES载体中，构建系列核酶体外转录载体及三核酶逆转录病毒载体