乌榄多酚的分离纯化及其抗氧化功效研究

来源 :华南师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nimadeburang
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
活性氧(ROS)是生物体有氧代谢中的副产物,是一类以氧为中心的自由基分子的总称,具有比分子氧更高的氧化活性。许多研究表明自由基对生物大分子的氧化性损伤与癌症、心脑血管疾病和糖尿病等密切相关。抗氧化剂作为活性氧的清除剂,已经成为自由基生物学与医学领域的研究热点。寻找优异的抗氧化剂,是生命科学领域的重要课题之一。植物多酚作为天然抗氧化剂,因具有抗氧化、抗炎抑菌、抗病毒和抗肿瘤等作用而受到广泛关注。乌榄(CanariumpimelaLeenhouts.)是我国南方特有的亚热带常绿果树之一,含有丰富的多酚。但是,目前国内外鲜有关于乌榄多酚化合物组成及其功效的报道。本课题以西山乌榄果实为材料,研究其营养成分组成、发育过程中的多酚含量与自由基清除能力之间的关系、多酚提取和纯化工艺、多酚成分的分离和结构鉴定并评价其抗氧化作用,对乌榄资源的深度开发利用及其药理研究提供理论依据,对乌榄种植业和加工业的发展具有指导作用和应用价值,主要结果如下:   (1)对乌榄新鲜果实不同部位的营养成分组成进行测定,结果表明,乌榄果肉中蛋白质含量为3.16g/100g,脂肪含量为20.2g/100g,总糖为5.09g/100g。乌榄核仁中蛋白质含量为23.9g/100g,脂肪含量为59.7g/100g,总糖为1.40g/100g。果肉和核仁蛋白的氨基酸种类齐全,氨基酸组成接近FAO/WHO组织推荐的理想模式值。果肉和核仁脂肪的主要脂肪酸种类皆为:棕榈酸、油酸和亚油酸,这三种酸的总和占全部脂肪酸的比例分别为90.06%和94.26%,果肉和核仁脂肪的不饱和脂肪酸的比例分别为60.84%和69.93%。乌榄果肉多酚含量为2.68g/100g,黄酮含量为99.07mg/100g。此外,研究结果还显示,乌榄果肉和核仁含有丰富的钙、钾和镁等矿物质元素。   (2)分别测定不同发育时期的乌榄果实的重量、多酚含量及其自由基清除能力,分析各指标之间的相关性。结果表明,乌榄果实的生长曲线呈双“S”形;多酚含量与自由基清除能力的相关性分析表明,DPPH·清除能力与多酚含量的相关系数r=0.982,P<0.01,呈极显著相关;O2·-清除能力与多酚的相关系数r=0.866,P<0.05,呈显著相关,提示多酚是乌榄的主要抗氧化活性物质。   (3)探讨了不同影响因素对乌榄多酚提取效果的影响,获得最佳的提取条件:提取3次、提取温度为70℃、料液比为1:20和乙醇浓度为40%。在乌榄多酚的纯化实验中,比较了6种大孔树脂(AB-8、S-8、NKA、NKA-Ⅱ、X-5与D-101)对乌榄多酚的吸附率和解吸率,选择D-101作为吸附树脂。在上样液浓度为2.0mg/ml、上样流速为3.0BV/h、洗脱剂为90%的乙醇、洗脱流速1.5BV/h的纯化条件下,经大孔树脂纯化后,多酚粗提物的纯度由28.6%提高到63.2%,纯化倍数约为2.2倍,多酚回收率为64.3%。   (4)运用柱层析、重结晶、薄层层析等方法对乌榄乙酸乙酯部进行分离,用质谱、紫外、核磁共振等技术从中鉴定出8个化合物单体,分别为:穗花杉双黄酮、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、莽草酸、槲皮素、山奈酚、3,3-二甲氧基鞣花酸、3,3,4-三甲氧基鞣花酸与豆甾醇,上述8个化合物均为首次从乌榄中分离得到,其中莽草酸、山奈酚、3,3,4-三甲氧基鞣花酸与豆甾醇为首次从橄榄属植物中分离得到。   (5)用不同的化学体系评价乌榄不同萃取部和化合物的抗氧化活性,结果显示,不同提取物和化合物对DPPH·的EC50从小到大依次为:没食子酸(5.81μg/ml)<槲皮素(7.47μg/ml)<乙酸乙酯部(8.52μg/ml)<正丁醇部(9.17μg/ml)<粗提物(13.89μg/ml)<山奈酚(14.55μg/ml)<水部(18.25μg/ml)<石油醚部(31.84μg/ml),对·OH的EC50从小到大依次为:槲皮素(96.07μg/ml)<乙酸乙酯部(114.21μg/ml)<正丁T醇部(144.05μg/ml)<VC(151.58μg/ml)<山奈酚(188.02μg/ml)<粗提物(209.97μg/ml)<水部(332.51μg/ml)<石油醚部(357.48μg/ml),对O2·-的EC50从小到大依次为:乙酸乙酯部(28.38μg/ml)<正丁醇部(33.72μg/ml)<槲皮素(40.01μg/ml)<芦丁(45.98μg/ml)<粗提物(48.98μg/ml)<山奈酚(54.89μg/ml)<水部(72.06μg/ml)<石油醚部(98.14μg/ml);当浓度为100μg/ml时,各提取物的总抗氧化能力从大到小依次为:槲皮素(242.36U/mg)>乙酸乙酯部(212.32U/mg)>VC(193.32U/mg)>山奈酚(142.11U/mg)>正丁醇部(102.55U/mg)>粗提物(54.24U/mg)>水部(44.24U/mg)>石油醚部(32.72U/mg)。上述结果表明,乌榄的主要抗氧化活性部位是乙酸乙酯部,槲皮素和山奈酚是乌榄的主要抗氧化物质之一。
其他文献
在生物和化学领域,检测离子种类与浓度分布是非常重要的。一般说来,溶液的浓度是均匀的。然而,溶液的浓度会因生物或化学反应而改变与不均。目前各种生物和化学传感器被开发出来
河套灌区灌溉水资源不足、土壤次生盐渍化等严重抑制了该区农业的持续、健康发展。如何合理、节约灌溉水资源,减少盐渍化发生是河套灌区农业发展面临的首要任务。本文针对河
目的 探讨丙戊酸(valproic acid,VPA)对胃癌细胞增殖、迁移的影响及可能涉及的分子机制.方法 以0、2、4、6和8 mmol·L-1浓度的VPA分别处理人胃癌细胞AGS、SGC-7901、MGC-803
期刊
@@
摘要:在多年的班主任工作实践中发现,但凡品学兼优的学生往往都有良好的行为习惯,凡是学习不好,多方面表现不佳的学生,往往没有良好的行为习惯。正如一句格言所说:“事实上,成功与失败的最大分别,来自不同的习惯。好习惯是开启成功的钥匙,坏习惯则是一扇向失败敞开的门。”可见,培养学生良好的行为习惯很重要。  关键词:爱;品格;桥梁;了解;关怀;尊重;责任;班风;鼓励表扬  中图分类号:G632.0 文献标识
随着社会发展,人们对高分辨率、高清晰度的彩色显示技术的需求越来越高。在各种显示技术中,LCoS技术充分融合了大规模集成电路和液晶显示两种成熟的技术,可以实现最高的自然像素
目的 探究裂果薯皂苷单体Ⅰ通过转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对人肝癌细胞SMMC-7721侵袭和转移的影响.方法 MTT法检测SMMC-7721细胞的增殖活性
癌症严重威胁着人类的生命健康,癌症的早期诊断和治疗是一个长期的挑战。为了快速的诊断癌症,研究者发展了多种方法,其中表面增强拉曼是一种快速高效检测癌症的方法。表面增强拉
与数字信号相比,通过模拟信号来实现音频的处理和传递有着许多无法克服的缺点:控制性较差,易受干扰,保密性不好。音频信号的数字化是大势所趋。互联网技术的广泛应用为数字音频信
学位