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目的:研究肌醇六磷酸(InositolHexaphosphate,IP6)对人结肠癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响,并探讨相关生物学机制,为IP6的应用提供依据。
方法:建立人结肠癌裸鼠皮下移植瘤模型,并按移植瘤体积随机区组为4组,每组6只。对照组:生理盐水;5-氟尿嘧啶组(20mg/kg);IP6干预组:分为低剂量组(40mg/kg)和高剂量组(100mg/kg),各组注射剂量均调整至0.5ml,每日腹腔注射一次。用药28d后经颈椎脱位处死小鼠。检测各组裸鼠皮下移植瘤的体积、重量以及裸鼠实验前后体重的变化,并取移植瘤及肝、肾进行病理学检测。应用荧光显微镜及电镜观察各组移植瘤组织及细胞的变化,Hoechst染色及TUNEL法检测移植瘤内细胞凋亡情况,免疫组化、RT-PCR及Western-blot印迹法检测癌细胞内PCNA、P53、bcl-2、及bax表达情况。
结果:24只裸鼠经皮下注射一定浓度人结肠癌HT-29细胞后,全部成瘤,成瘤率100%。实验期间,除5-FU组小鼠状态较差,一只出现死亡外,其余各组小鼠状态良好,未出现任何不良反应。由裸鼠皮下移植瘤生长曲线可见,与对照组相比,IP6干预组、5-FU组裸鼠皮下移植瘤的生长减慢。对照组、低、高IP6剂量组及5-FU组给药前后移植瘤体积的变化分别为(0.66±0.15)cm3、(0.45±0.06)cm3、(0.41±0.08)cm3、(0.26±0.54)cm3,IP6干预组与对照组及5-FU组相比,均存在显著性差异(P<0.05),IP6干预组间无显著性差异(P>0.05);对照组、低、高IP6剂量组及5-FU组瘤重分别为(0.80±0.22)g、(0.50±0.10)g(0.46±0.13)g、(0.25±0.92)g,与对照组相比,IP6干预组瘤重降低,差别具有显著性(P<0.05),与5-FU组比,差别也具有显著性(P<0.05),IP6干预组间无显著性差异(P>0.05)。Hoechst染色及TUNEL检测结果显示,与对照组相比,IP6干预组癌细胞的凋亡率显著升高(P<0.05);免疫组化结果表明,IP6干预组癌细胞内PCNA及突变型P53蛋白的表达降低,与对照组相比,差别具有显著性(P
结论:IP6可显著抑制人结肠癌裸鼠皮下移植瘤的生长,具有明显的抗癌作用,且IP6发挥抗癌作用时,副作用小,安全性高。IP6能降低癌细胞PCNA及突变型P53的表达,并调节凋亡相关基因bcl-2及bax的表达,影响癌细胞内信号转导,抑制癌细胞增殖,促进癌细胞凋亡。
方法:建立人结肠癌裸鼠皮下移植瘤模型,并按移植瘤体积随机区组为4组,每组6只。对照组:生理盐水;5-氟尿嘧啶组(20mg/kg);IP6干预组:分为低剂量组(40mg/kg)和高剂量组(100mg/kg),各组注射剂量均调整至0.5ml,每日腹腔注射一次。用药28d后经颈椎脱位处死小鼠。检测各组裸鼠皮下移植瘤的体积、重量以及裸鼠实验前后体重的变化,并取移植瘤及肝、肾进行病理学检测。应用荧光显微镜及电镜观察各组移植瘤组织及细胞的变化,Hoechst染色及TUNEL法检测移植瘤内细胞凋亡情况,免疫组化、RT-PCR及Western-blot印迹法检测癌细胞内PCNA、P53、bcl-2、及bax表达情况。
结果:24只裸鼠经皮下注射一定浓度人结肠癌HT-29细胞后,全部成瘤,成瘤率100%。实验期间,除5-FU组小鼠状态较差,一只出现死亡外,其余各组小鼠状态良好,未出现任何不良反应。由裸鼠皮下移植瘤生长曲线可见,与对照组相比,IP6干预组、5-FU组裸鼠皮下移植瘤的生长减慢。对照组、低、高IP6剂量组及5-FU组给药前后移植瘤体积的变化分别为(0.66±0.15)cm3、(0.45±0.06)cm3、(0.41±0.08)cm3、(0.26±0.54)cm3,IP6干预组与对照组及5-FU组相比,均存在显著性差异(P<0.05),IP6干预组间无显著性差异(P>0.05);对照组、低、高IP6剂量组及5-FU组瘤重分别为(0.80±0.22)g、(0.50±0.10)g(0.46±0.13)g、(0.25±0.92)g,与对照组相比,IP6干预组瘤重降低,差别具有显著性(P<0.05),与5-FU组比,差别也具有显著性(P<0.05),IP6干预组间无显著性差异(P>0.05)。Hoechst染色及TUNEL检测结果显示,与对照组相比,IP6干预组癌细胞的凋亡率显著升高(P<0.05);免疫组化结果表明,IP6干预组癌细胞内PCNA及突变型P53蛋白的表达降低,与对照组相比,差别具有显著性(P