【摘 要】
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该文以该实验室从河北宣化农药厂的工业废水中分离的高效降解阿特拉津的土壤杆菌(Agrobacterium sp.)AD4菌株总DNA为模板,以假单胞菌ADP的atzA为参考序列设计PCR引物,通过PCR
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该文以该实验室从河北宣化农药厂的工业废水中分离的高效降解阿特拉津的土壤杆菌(Agrobacterium sp.)AD4菌株总DNA为模板,以假单胞菌ADP的atzA为参考序列设计PCR引物,通过PCR扩增,得到atzA基因中心区片段,并克隆测序,得知此片段长528bp,在对AD1菌株,ADP菌株和AD4菌株的atzA基因同源性比较中,发现其基因片段与其它两个同源基因有3个碱基不同,37(G->A),330(A->G),187(G->T),同源性为99﹪.经DNAstar软件分析其读码框架,有一个氨基酸不同,ADP菌株和AD1菌株的第177个密码子是CAA,编码谷氨酰胺,AD4菌株PCR片段的第110个密码子是CGA,编码精氨酸.认为不同降解菌株之间,atzA基因同源性较高.该文以PCR反应扩增的atzA基因片段作为探针,与其它阿特拉津降解菌株杂交,认为很多阿特拉津降解菌株的atzA基因都是同源的.但AD2菌株没有阳性结果,认为其降解阿特拉津的基因与atzA不同,而且该文将AD1菌株的atzA基因定位于染色体上.该文以该实验室克隆制得的AD1菌株阿特拉津氮水解酶基因为材料,克隆至pGEM-T载体,转化至大肠杆菌DH5α中表达,并检测其降解阿特拉津的能力,通过阿特拉津平板降解情况,酶液与阿特拉津溶液温育后,OD<,220>值的变化,表明此工程菌能够降解阿特拉津,有表达活性.
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