蝗虫体内含有丰富的蛋白质、人体必需氨基酸、维生素、微量元素和不饱和脂肪酸等,具有较高的开发价值。本文对中华稻蝗蛋白提取、酶解和抗氧化肽的发现进行了研究。结果如下: 蝗虫蛋白质含量高,氨基酸组成合理,必需氨基酸种类齐全,是优质的蛋白质资源。 中华稻蝗各类型蛋白质的提取率分别为:一次水溶蛋白26.5%、二次水溶蛋白21.9%、酸溶性蛋白质2.8%、碱溶性蛋白质1.2%、醇溶性蛋白质0.3%。中华稻蝗蛋白质以水溶性蛋白质(48.4%)为主,易被人及其它动物吸收利用。 中华稻蝗水溶性蛋白提取的最佳工艺条件为料液比(g/mL)为1:15,提取液pH7.4,NaCl浓度为1.0%,提取时间为4h。 比较了不同蛋白酶酶解中华稻蝗蛋白的条件及酶解物的抗氧化活性,确定了Alcalase碱性蛋白酶为首选酶。 研究了用Alcalase碱性蛋白酶对中华稻蝗蛋白成分进行酶解处理的影响因素,确定了适宜的酶解条件为:底物浓度3.0%,酶用量(V/V,%)10%、pH 8.0,酶解温度55℃,作用时间4h。中华稻蝗蛋白质经酶解处理获得的多肽混合溶液具有较高的抗氧化活性,对邻苯三酚自氧化的抑制率可达40%。 在非油质体系中,酶解物能很好的清除超氧阴离子自由基,但清除效果不如V_C的效果好;酶解物清除羟基自由基的效果与V_C相当:清除DPPH自由基和其还原能力强于V_C。 在油质体系中,酶解物能很好的抑制猪油和亚油酸的自氧化的发生,延长亚油酸自氧化的诱导期。 通过Sephadex G-25凝胶过滤色谱,酶解物被分离成四个组分,四个组分中组分Ⅲ的抗氧化活性最强。 利用强酸性阳离子交换色谱将组分分离成三部分。组分Ⅱ对邻苯三酚自氧化(PR)的抑制率远大于组分Ⅰ和组分Ⅲ,对组分Ⅱ进行下一步的分离。 利用强碱性阴离子交换色谱组分Ⅱ被分离成三个组分,其中组分B的抑制率最高。将组分B进行下一步的分析。 经过硅胶板薄层色谱,色谱板上呈现多个斑点,这说明经过三步分离纯化的组分中所含的多肽仍然一个混合的多肽,要想得到纯的多肽需进一步分离。 酶解物可显著提高受试小鼠血清、肝组织、脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、