小口径脱细胞血管支架制备方案的优化、评价及其异种原位移植的初步研究

来源 :厦门大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:lichengjing626
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血管组织工程(Vascular tissue engineering,VTE)的研究核心是种子细胞、可供细胞进行生命活动的血管支架材料以及种子细胞与血管支架间的相互作用,其中找到合适的血管支架是最关键的步骤。血管支架是种子细胞在体外生长所必须的支撑物,其力学特性可以为体外血管的组织化提供一定的机械强度,是种子细胞生长必不可少的三维空间架构。血管支架,尤其是生物来源的脱细胞支架含有丰富的生物信息可以促进细胞粘附与生长、增殖,在组织再生过程中亦能为细胞(包括体外培养时的种子细胞和移植体内后的宿主细胞)的生长、迁移、分化,以及新组织的细胞外基质的分泌提供支持,并且参与决定新生组织的基本结构,因此血管支架材料在血管组织工程构建中起到非常重要的作用。目前直径6 mm以上的大口径血管已有大量临床应用而对6 mm以下的小口径血管却仍有许多基础问题亟待解决。天然血管组织经过处理脱除细胞后,保留了其天然的物理支架结构及力学性能,非常符合体内血管的生物学结构需求,并且富含细胞粘附序列及生长因子,生物相容性较好。但从开始制备血管支架脱细胞基质到最后消毒、储存阶段的每一个处理步骤均会对脱细胞基质的微结构、组成成分、力学特性等产生影响,进而影响其生物相容性和移植后宿主可能诱发的免疫反应。因此,本课题选取了兔颈动脉((?)=2 mm)作为小口径血管支架的来源,通过比对羊的血管支架制备过程((?)=3-4 mm),对制备流程进行了细致的优化,包括物理、化学、生物等多种条件的细节处理。并通过表观评价、组织学评价、血管力学评价、组化评价等多方面条件比较,最终确定出一个最优方案,可以使脱细胞后的血管支架具有较低的生物毒性和较高的免疫相容性。并且,通过探索性实验,本文发现利用该脱细胞血管的制备流程获得的血管支架可进行原位移植,初步构建了兔颈动脉-大鼠腹主动脉的异种原位移植模型。从理论和实践上,验证了不种植细胞的血管支架异种原位移植的可行性;兔颈动脉与大鼠腹主动脉直径相仿,吻合度极高,可将其作为小口径天然细胞外基质(Extracellular matric,ECM)构建的组织工程血管的实验室常规模型;手术移植成功率或与大鼠重量和进食量具有相关性,有望通过进一步研究证实。
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