目的：　　1.研究G蛋白抑制性亚基Gαi1与Gαi3在睫状神经生长因子（Ciliary nerve growth factor，CNTF）激活Akt-mTORC1通路与增加Gab1、Erk、GSK-3β磷酸化水平过程中的作用。　　2.Gαi1与Gαi3在鱼藤酮（rotenone）与6-羟基多巴胺氢溴酸盐（6-Hydroxydopamine hydrobromide,6-OHDA）所致细胞损伤过程中的作用及机制。　　方法：　　以野生型小鼠胚胎成纤维细胞（WT MEFs）、Gαi1与Gαi3双敲除MEFs（DKO MEFs）、单一敲除Gαi1、Gαi3或Gαi2的MEFs（Gαi1-KO MEFs、Gαi3-KO MEFs、Gαi2-KO MEFs）、敲除Gab1的MEFs细胞（Gab1-KO MEFs）为工具细胞，CNTF为工具药物，用CNTF分别处理上述MEFs细胞，应用Western Blotting检测pGab1（627Y）、Gab1、Akt1/2/3、pAkt(473S)、pAkt（308T）、pErk1/2、Erk1/2、pGSK-3β（9S）、GSK-3β、pmTOR、mTOR、pS6K（389T）、pS6（235/236S）等蛋白的含量。通过慢病毒构建Gαi1与Gαi3 shRNA载体干扰MEFs中Gαi1与Gαi3的表达，或通过将Gαi1与Gαi3基因序列重新导入DKO-MEFs中，恢复细胞中Gαi1与Gαi3的表达，应用Western blotting进一步验证Gαi1与Gαi3在CNTF激活Akt-mTORC1通路及pErk1/2、Gab1蛋白及磷酸化抑制 pGSK-3β（9S）作用。应用鱼藤酮及 CNTF对SK-N-SH进行处理，MTT法检测细胞活性。以慢病毒作为载体通过 shRNA干扰SK-N-SH细胞内Gαi1或Gαi3的表达，然后再用鱼藤酮及CNTF对其进行处理，MTT实验检测CNTF与鱼藤酮处理后细胞活性，应用Western blotting检测相关信号蛋白的改变，进一步研究Gαi1与Gαi3在CNTF对鱼藤酮损伤细胞中的保护作用的机制。鱼藤酮或6-OHDA处理WT MEFs，DKO MEFs后，通过MTT检测两种细胞活性， Western Blotting检测P38、JNK、AMPK等信号蛋白的活化水平。　　结果：　　1. Gαi1与Gαi3基因同时敲除后CNTF诱导的pGab（627Y）、pAkt(473S)、pAkt（308T）、pErk1/2、pGSK-3β（9S）、pmTOR、pS6K（389T）、pS6（235/236S）的水平显著降低（p<0.05）。　　2.单一敲除Gαi1、Gαi3基因会在一定程度上抑制CNTF对Akt-mTORC1通路信号蛋白的活化及Erk、Gab1、GSK-3β磷酸化水平，其中以Gαi3蛋白的缺失对该通路激活作用影响较明显，而单一敲除Gαi2基因未产生上述现象（p<0.05）。　　3.Gab1基因敲除后，抑制了CNTF诱导的pAkt(473S)、pAkt（308T）、pErk1/2、pGSK-3β（9S）、pS6K（389T）、pS6（235/236S）磷酸化水平的升高（p<0.05）。　　4.CNTF对鱼藤酮所致的细胞损伤有一定的保护作用（p<0.05）。　　5.同时缺失Gαi1与Gαi3蛋白的MEFs可减轻鱼藤酮对其损伤作用，鱼藤酮对该细胞中p38、 JNK、AMPK信号通路的活化作用减弱（p<0.05）。　　结论：　　Gαi1、Gαi3及Gab1在CNTF激活Akt-mTORC1通路及Erk、GSK-3β的磷酸化过程中具有重要作用，且Gab1位于Gαi蛋白下游，Akt信号蛋白上游。细胞内Gαi1与 Gαi3蛋白的缺失可减轻鱼藤酮和6-OHDA对细胞的损伤作用，机制可能为 Gαi1与Gαi3的缺失减弱了鱼藤酮和6-OHDA对细胞内P38、JNK、AMPK活化作用。