【摘 要】
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目的:慢性炎症在胰腺癌进展中扮演着了重要角色。我们前期研究发现,承气解胰汤具有抗炎作用,在临床应用中与化疗联合可减轻胰腺癌患者的临床症状,并且增强化疗药物的有效率。
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目的:慢性炎症在胰腺癌进展中扮演着了重要角色。我们前期研究发现,承气解胰汤具有抗炎作用,在临床应用中与化疗联合可减轻胰腺癌患者的临床症状,并且增强化疗药物的有效率。在本研究中,我们主要研究承气解胰汤对胰腺癌的治疗效果,探讨承气解胰汤是否通过抑制炎症改善肿瘤炎症微环境(tumor microenvironment,TME),从而发挥抑制胰腺癌的作用。方法:1.应用裸鼠胰腺原位注射胰腺癌PANC-1细胞株悬液法构建胰腺癌模型。2.应用Luminex技术检测小鼠移植瘤平均萤光强度。3.应用免疫组化方法检测胰腺癌移植瘤的CD68、CD163及Ki-67的表达。4.应用流式细胞术检测M2型巨噬细胞(CD68+/CD163+/CD206+)的比例。5.应用基因芯片及生物信息学方法行GO(gene ontology)分析及pathway分析。6.应用Real-time PCR技术检测胰腺癌细胞中CD24、CD44及EPCAM的m RNA表达水平。7.应用流式细胞术检测胰腺癌细胞中CD24、CD44及EPCAM的蛋白表达水平以及CD44+/CD24+/EPCAM+细胞群的比例。8.应用尾静脉注射二丁基二氯化锡(dibutyltin dichloride,DBTC)构建小鼠慢性胰腺炎模型。9.应用SPSS 22.0软件分析实验数据,用卡方检验、成组t检验分析组内间差异。结果:1.承气解胰汤处理可抑制裸鼠胰腺原位移植瘤模型中肿瘤的生长。2.承气解胰汤减少裸鼠移植瘤组织Ki-67的表达。3.承气解胰汤减少裸鼠移植瘤组织CD68、CD163阳性细胞的浸润。4.承气解胰汤可在体外减少M2型巨噬细胞的比例。5.承气解胰汤影响巨噬细胞多个分化相关基因的表达,并主要通过PI3K-AKT、m TOR等信号通路抑制巨噬细胞分化。6.巨噬细胞条件培养基(macrophage conditioned medium,MCM)促进胰腺癌细胞干性的表达。7.MCM增加胰腺癌干细胞群(CD44+/CD24+/EPCAM+)的比例。8.通过炎症微环境发挥抗肿瘤作用。具有炎症基础的裸鼠,承气解胰汤联合吉西他滨可发挥协同作用。而在无炎症基础上的移植瘤模型中,则无协同作用。结论:承气解胰汤通过m TOR、PI3K-AKT等信号通路抑制巨噬细胞分化,减轻M2型肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)的浸润,调节肿瘤炎症微环境,进而发挥抑制胰腺癌发展的作用。另外,本实验证实MCM可上调胰腺癌肿瘤干细胞干性,推测承气解胰汤可能还通过减少TAMs间接参与胰腺癌肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)干性的下调,提高对化疗的敏感性。这为胰腺癌的治疗提供了新的思路。
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